第三章食用菌菌种制作..pptVIP

第三章 食用菌菌种制作 菌种的制作是食用菌栽培的前提和重要环节，菌种质量的好坏直接影响栽培的成败和产量的高低，只有优良的菌种才能获得高产和优质的产品，因此生产优良的菌种是食用菌栽培的一个极其重要的环节。 第一节 制种条件 制种条件主要包括制种场地，仪器设备和消毒灭菌的药品。为了确保菌种的质量和数量，必须科学地选择和合理布局制种场地，具备必要的仪器设备、用具及消毒灭菌的药品等，才能制备出优质菌种。 二、主要生产设备 一、制培养基设备 二、灭菌设备 三、接种设备 四、培养设备 五、保藏设备 三、常用的消毒灭菌药品 （一）、消毒杀菌剂 化学消毒杀菌剂广泛用于食用菌生产过程中的消毒灭菌，其主要种类有： 1、重金属盐类：如汞、银、铝、锌、铜等。 杀菌机理：是通过与蛋白质结合而引起蛋白质变性。低浓度的重金属对微生物起到抑制或杀死作用。微生物浸在0.1~0.5 %硝酸银升汞溶液中，几分种就会死亡。 常用0.1~0.2%升汞溶液对玻璃器皿、非金属器械及用于菌种分离的菌菇、菇木进行表面消毒。 2、氧化剂：如高锰酸钾、过氧化氢、臭氧、漂白粉等。 杀菌作用：通过强烈的氧化作用，破坏微生物的原生质或酶蛋白质结构。 3、还原剂：如甲醛，5%的甲醛可杀死细菌芽孢和真菌孢子。 甲醛能与微生物细胞蛋白质的氨基酸结合，引起蛋白质变性。使原生质失去正常活动能力。 4、表面活性剂：如乙醇，75%乙醇的消毒力最强，过高过低消毒效果都差。 常用于接种前手指消毒及不耐热制品的消毒。 5、其它消毒剂：石灰，以4份生石灰加入1份水，即生成熟石灰、并放出热，具有杀菌作用。硫磺，常用于培养室和出菇房等空间熏蒸杀菌。杀菌机理：硫磺粉燃烧后产生二氧化硫，二氧化硫与水作用生成亚硫酸，亚硫酸能夺取菌体细胞中的氧，菌体细胞因脱氧至死。 （二）、表面消毒杀菌 表面消毒常用于菌种的分离材料、接种人员的手、器材、工作台面、墙壁等的杀菌处理，表面消毒剂的种类很多，一般是通过涂抹、喷雾、浸泡、洗刷等方法使用。 1、菌种分离材料的表面消毒：子实体未外露的，用0.1%升汞溶液浸泡1分钟；子实体已外露的种菇材料，只能用75%酒精棉球擦菌盖表面和菌柄，不能浸泡在升汞溶液中。 2、手的表面消毒：先用肥皂洗手，再用1~2%来苏尔等溶液浸泡2分钟。接种前用之于75%酒精擦手。 3、接种工具的消毒杀菌，先用75%酒精擦拭刀片、镊子、接种铲等工具，然后用酒精灯火焰燃烧。 4、器皿的杀菌：利用高温空气进行干热灭菌，具体方法是：，生产中也常用高压蒸汽灭菌法对器皿进行灭菌。 5、墙壁、台面、菇床的表面消毒：常用2~5%的漂白粉洗刷接种室、培养室墙壁、地面、床架、用具等。 （三）、室内空间杀菌 接种箱、培养室、出菇房的空间消毒主要采用紫外线杀菌和气体灭菌法，还可辅以空间喷雾的方法，增强杀菌的效果。 1、紫外线杀菌法 适用：一般应用于无菌室、接种箱、超净工作台内的灭菌。只适用于空气和物体表面的消毒。 使用方法：一般照射20～30min，可杀死空气中95%的细菌。应该在黑暗中使用紫外线。 杀菌机理：导致菌体细胞内核酸和酶发生光化学变化，而使细胞死亡；紫外线可使空气中的氧气产生臭氧，臭氧也具杀菌作用。 2、气体灭菌法（熏蒸杀菌法） 适用：接种箱、接种室和菇房消毒。 常用药物：40%甲醛溶液、硫磺、菇保一号、科达气雾消毒盒、克霉灵气雾消毒剂。 （3）根据切取的组织来源不同，组织分离可分为子实体组织分离、菌核菌索组织分离和机内菌丝分离三种方法。生产上最常用的是子实体组织分离。 子实体组织分离：从食用菌的子实体上切取一块组织，通过分离培养而获得母种的方法。 菌核菌索组织分离：在菌核菌索上切取一块组织，通过分离培养而获得母种的方法。 机内菌丝组织分离：在培养基中直接挑取生长的菌丝，通过分离培养而获得母种的方法。 取大型伞菌子实体菌柄与菌盖交界处或菌柄上部的菌肉，分离效果最好。 金针菇是横切菌盖上薄的菌肉或取未开伞的幼嫩子实体的菌褶片 灵芝组织分离所取的部位是菌盖边缘的白色生长圈 木耳等胶质菌类的菌肉薄，子实体经无菌水反复冲洗后，撕开子实体或用刀片将两层耳片切开，挑取一小块菌肉组织即可。 操作过程（以子实体组织分离为例）： 种菇选择：选择头潮菇、外观典型、大小适中、菌肉肥厚、颜色正常、尚未散孢、无病虫害、长至七八分成熟的优质单朵菇作种菇。 种菇消毒：0.1%升汞溶液或75%酒精，浸泡或擦拭，无菌水冲洗，吸干表面的水分。 切块接种：将分离种菇沿柄中心纵向掰成两半，用解剖刀在菇盖柄交接处划成田字形，取黄豆大一小块菌肉组织，接在斜面培养基上。 培养纯化：在25℃下，培养2～4d长出白色绒毛状菌丝体，当菌丝延伸到基质上后，用接种针挑取菌丝顶端部分，接种到新的斜面培