高中生物选修三《基因工程》专题复习课件.ppt

1.细胞染色体外能自主复制的小型环状DNA分子 2.质粒是基因工程中最常用的运载体 3.最常用的质粒是大肠杆菌的质粒 4.存在于许多细菌及酵母菌等生物中 5.质粒的存在对宿主细胞无影响 返回 上页 下页 常考点24 常考点21 常考点22 常考点23 现代生物科技专题（选修三） 基因工程专题复习 济源一中 [z x x k 学科网] 《创新教学模式-打造高效课堂》 一、 课前提问（10分钟） 1、DNA重组技术的基本工具有哪些？ 分别什么作用？ 2、基因工程的基本操作程序？核心是什么？ 3、基因文库和cDNA文库的区别？ 4、PCR的原理、过程及条件？ 5、基因表达载体的组成？ 6、将目的基因导入植物细胞的方法？ 7、将目的基因导入动物细胞的方法？ 8、将目的基因导入微生物细胞的方法？ 9、目的基因的检测与鉴定步骤？[z x x k 学科网] 10、什么是基因治疗？有几种类型？ 11、蛋白质工程的基本途径？ 1、限制酶特异性的理解： 一般情况下，一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，这就是限制酶的特异性。但有些特例，不同的限制酶识别同一种碱基序列且切点相同。 如：BamHⅠ、BstⅠ都可识别——GGATCC——序列。这两种限制酶切割DNA分子后产生相同粘性末端。如： BamHⅠ识别——GGATCC——序列,切点在G与G之间；BglⅡ识别——AGATCT——，切点在A与G之间；粘性末端均为——CTAG和GATC——。还有少数限制酶却可识别不止一种碱基序列。 二、重难点剖析（20分钟） G A A T T C G C T T A A A A T T C G 限制酶切割ＤＮＡ分子示意图[z x x k 学科网] C T T A A G 黏性末端 黏性末端 基因工程疑难问题的解读： ……GAATTC…… ……CTTAAG…… ……GAATTC…… ……CTTAAG…… EcoRⅠ ……GAATTC…… ……CTTAAG…… ……GAATTC…… ……CTTAAG…… 不同来源的DNA片段混合 将不同种来源的DNA片段连接起来 生物A基因片段 生物B基因片段 ……G　　AATTC…… ……CTTAA　　G…… 酶切 ……GAATTC…… ……CTTAAG…… ……G　　AATTC…… ……CTTAA　　G…… ……G　　AATTC…… ……CTTAA　　G…… 同一种 用同一种限制性酶处理不同DNA片段，会形成同样的黏性末端，可进行重组。 2．基因工程的基本工具的比较 作用 作用 部位 限制酶 DNA连接酶 载体 切割目的基因和载体 拼接DNA片段，形成重组DNA 携带目的基因进入受体细胞 作用 特点 (条件) 常用 类型 (1)识别特定的核苷酸序列 (2)在特定位点上切割 (1)E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端 (2)T4DNA连接酶能连接黏性末端和平末端 (1)能在宿主细胞内稳定存在并大量复制 (2)有多个限制酶切割位点 (3)具有特殊的标记基因 EcoRⅠ限制酶 SmaⅠ限制酶 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒 两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键 3.PCR技术与DNA复制的比较 相 同 点 不 同 点 原理 原料 条件 解旋方式 场所 酶、引物 结果 PCR技术 热稳定DNA聚合酶 需引物 短时间内形成大量DNA片段 DNA复制 细胞内含有的DNA聚合酶， 不需引物 形成整个DNA分子 （碱基互补配对） 四种脱氧核苷酸 模板、ATP、酶 体外复制 细胞核内 DNA在高温下变性解旋 解旋酶催化 DNA双链复制 4.将目的基因导入受体细胞中的方法的比较 生物种类 常用方法 受体细胞 转化过程 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 农杆菌转化法 显微注射法 Ca2＋处理法 体细胞 受精卵 原核细胞（大肠杆菌） 目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的染色体DNA→表达 目的基因表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 5.目的基因的检测内容和方法的比较 分子水平检测 ①首先要导入检测（ ） ②其次要转录检测： （ ） ③最后要翻译检测： （ ） 具体方法 利用（