高中生物选修专题和.ppt

考点二 动物细胞融合与单克隆抗体 1.植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性、细胞的增殖 融合前 处理 先除去细胞壁 先使细胞分散开 使用 的酶 纤维素酶和果胶酶 胰蛋白酶 比较 项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 诱导 手段 物理法:离心、电激、振动 化学法:聚乙二醇等试剂诱导 除物理法和化学法外,也可用灭活的病毒诱导 结果 杂种植株 杂交细胞 应用 培育植物新品种 主要用于制备 单克隆抗体 意义 突破远缘杂交不亲和的障碍,打破了生殖隔离,扩展了杂交的亲本组合 相同点 原生质体融合原理相同;原生质体融合的方法相似 2.单克隆抗体的制备 (1)取相应B淋巴细胞前必须先注射相应抗原蛋白,否则不能获得单克隆抗体。 (2)细胞融合后需经二次筛选: ①第一次:在特定的选择性培养基上,未融合的亲本细胞(B淋巴细胞和骨髓瘤细胞)和融合的具有同种核的细胞(BB融合细胞、瘤瘤融合细胞)都会死亡,只有融合的杂交细胞(杂交瘤细胞)才能生长。这种杂交细胞的特点是既能迅速大量繁殖,又能产生单一的特异性抗体。 ②第二次:经选择性培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞(很多种杂交瘤细胞),需经克隆化培养和抗体检测,经筛选后才可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 【特别提醒】 (1)植物体细胞杂交与动物细胞融合中酶的作用对象不同,纤维素酶和果胶酶作用于细胞壁,而胰蛋白酶等作用于细胞间的蛋白质。 (2)灭活的病毒保持了其抗原性,但毒性消失。 (3)植物杂交细胞在激素诱导下能表达出全能性,但动物杂交细胞的全能性不能表达。 【典例2】科学家已分离出H1N1病毒(一种RNA病毒)。某制药厂根据下面流程图生产预防和治疗甲流的抗体,请据图回答有关问题: (1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是取自感染病毒的人体内的　　　　细胞,促进d过程的常用诱导剂是　　　　　。 (2)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成　　　种类型的C细胞,因此需用培养基筛选出____________________________　　　　　　　　　　　　　　　(填特点)的D细胞用于培养。D细胞的名称是　　　　　。 (3)理论上,注射了该抗体的人群不能长期对甲流免疫,试分析原因:　　　　　　　　　　　　。 (4)不同种动物的体细胞融合,相比诱变育种和杂交育种方法,具有　　　　　　　　　　　　　等突出的特点。 (5)请说明单克隆抗体的主要作用:　　　　　　　　　　　。 【解析】(1)由于本题的目的是制备用于预防和治疗甲流的单克隆抗体,所以B细胞只能是取自感染H1N1病毒的动物或人体内的B淋巴细胞,经诱导剂聚乙二醇(PEG)或灭活的病毒等诱导融合,得到的杂交瘤细胞才能用于生产预防和治疗甲流的单克隆抗体。 (2)仅考虑两个细胞的融合,则可形成A细胞—A细胞、B细胞—B细胞、A细胞—B细胞3种类型的C细胞,为了从中筛选出A细胞—B细胞,必须用特定的选择培养基进行筛选,筛选出的D细胞(杂交瘤细胞)既能无限增殖又能产生特异性抗体。 (3)因为单链RNA容易发生变异,一旦变异后体内的记忆细胞和抗体就不能对其发挥作用。 (4)不同种动物的体细胞融合,相比诱变育种和杂交育种方法,具有目的性强,克服远缘杂交不亲和性(能有效地打破物种的生殖隔离界限)等突出特点。 (5)单克隆抗体可用于诊断疾病、药物导向治疗等方面。 答案:(1)B淋巴 聚乙二醇(PEG)(灭活的病毒) (2)3　既能无限增殖又能产生特异性抗体 杂交瘤细胞(杂交细胞) (3)引起甲流的病毒不断发生变异(意思相同即可) (4)目的性强,克服远缘杂交不亲和性(能有效地打破物种的生殖隔离界限)(意思相同即可) (5)作为诊断试剂;用于治疗疾病和运载药物(意思相同即可) 【互动探究】 (1)若图中AB细胞是植物细胞,则融合前需要进行什么处理? 提示:利用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁。因为细胞融合利用了细胞膜具有流动性的原理,细胞壁是细胞融合的障碍。 (2)体外培养和体内培养最后如何才能提取到单克隆抗体? 提示:体外培养时从细胞培养液中提取,体内培养则从小鼠腹水中提取。 能力挑战题)运用动物体细胞杂交技术可实现基因定位。研究发现:用人体细胞与小鼠体细胞进行杂交得到的杂种细胞含有双方的染色体。杂种细胞在持续分裂过程中仅保留小鼠的染色体而人的染色体则逐渐丢失,最后只剩一条或几条染色体。如图是人的缺乏HGPRT酶的突变细胞株(HGPRT-)和小鼠的缺乏TK酶的细胞株(TK-)融合后在HAT培养液中培养的过程,结果表明,最终人的染色体在融合细胞中仅存有3号染色体或17号染色体或两者都有。已知只有同时具有HGPRT酶和TK酶的融合细胞才可在HAT培养液中长期存活与繁殖。 (1