微生物生理学实验指导(圈起来不做).docVIP

微生物生理学实验 ―――铜绿假单胞菌fabI基因的克隆及功能鉴定 目 录实验〇 铜绿假单胞菌fabI基因鉴定的原理 实验一 细菌总DNA的提取与检测 实验二 铜绿假单胞菌fabI基因PCR扩增 实验三 铜绿假单胞菌pafabI基因表达载体构建 实验四 质粒的提取与检测 实验五 大肠杆菌感受态细胞的制备及DNA转化 实验六 遗传互补大肠杆菌fabI温度敏感突变菌株 实验七 铜绿假单胞菌烯酯酰ACP还原酶的原核表达 实验八 铜绿假单胞菌烯酯酰ACP还原酶纯化 实验九 体外鉴定烯酯酰ACP还原酶的酶活性 实验十 构建铜绿假单胞菌fabI突变菌株 实验十一 菌落PCR筛选重组子 实验十二 铜绿假单胞菌脂肪酸合成分析 实验报告 实验〇 铜绿假单胞菌fabI基因鉴定的原理 脂肪酸的生物合成是一种细胞生物体重要的基础代谢。生物体脂肪酸合成系统（FAS）为磷脂和类脂等生物质膜组分提供重要的前体物质，同时生物体内一些重要的化合物如硫辛酸、生物素以及细菌群体感应的信号分子等也都需要以脂肪酸合成代谢中的中间产物为前体物质合成。 在不同生物体内，脂肪酸的生物合成过程的基本原理是相似的，但是催化反应的蛋白序列和结构则有着很大的差异。根据合成酶系统的这种差异，人们将脂肪酸生物合成系统分为I型脂肪酸合成酶系（FASI）和II型脂肪酸合成酶系（FAS II）(Cro