雌激素对SAMP8小鼠学习记忆及海马CA1区神经元的影响.pdfVIP

中文摘要 生理盐水快速冲洗，用2％多聚甲醛．2％戊二醛混合固定液常 规灌注固定，持续1h，取鼠脑海马CAl区组织块放入固定 液中，经1％锇酸固定1．5h(4。C)、常规脱水、100％丙酮脱水、 包埋液包埋、半薄切片定位锥体细胞层、超薄切片、重金属 电子染色后用H．7500型透射电镜观察海马CAl区细胞超微 结构并拍照。 3．HE染色、免疫组化的观察：小鼠给予6％水合氯醛 腹腔注射麻醉，经左心室．升主动脉插管，同时剪开右心耳， 用生理盐水冲洗，4％多聚甲醛灌注lh。自上丘至视交叉节 段取脑组织，制备二套石蜡切片，分别用于HE染色，抗nNOS 免疫组化染色。 4．流式细胞仪检测：将小鼠断头取脑，迅速于冰盘上 剥离海马组织，于4℃70％乙醇中固定。采用网搓法制备单 细胞悬液，抗nNOS多克隆抗体孵育，流式细胞仪进行检测。 结果： 间探索试验：OVX组的游泳轨迹主要呈随机分布状态， 统计学差异(PO．05)。 絮乱，细胞间隙增大，细胞数量明显减少，大量锥体细胞空 泡变及浓染。OVX+E组：CAl区细胞层次排列尚规整，细 中文摘要 胞间隙增大不明显，少量锥体细胞浓染。SHAM组：CAl区 细胞层次清楚，排列整齐紧密均匀，细胞结构完整，核仁清 晰可见。· 3．透射电镜观察结果：OVX组：CAl区大部分锥体细 胞核膜结构模糊不清，染色质边集以及大量脂褐素颗粒沉 积，线粒体肿胀明显。OVX+E组：CAl区多数锥体细胞结 构较完整，核仁明显，染色质分布均匀，线粒体大小及形态 正常，个别细胞可见核膜双层结构不清晰和染色质边际现象 一致。R1组：CAl区锥体细胞结构完整，核膜双层结构清 晰可见，核仁明显，染色质分布均匀，胞质粗面内质网、高 尔基体和核糖体等细胞器结构完好，线粒体大小及形态正 常。 4．免疫组化试验观察结果：OVX组阳性神经元数量及 +E组与SHAM组比较无明显差Y)J(P0．05)。 5．流式细胞术检测结果：流式细胞术检测nNOSFI值 统计学意义(PO．05)。 结论： 1．SAMP8小鼠去卵巢后，雌激素的缺乏导致学习记忆 能力下降；雌激素补充治疗能减轻内源性雌激素下降对学习 记忆功能的损害，改善学习记忆能力。 2．SAMP8小鼠去卵巢后，雌激素缺乏导致海马神经元 中文摘要 排列疏松紊乱、细胞肿胀变性，细胞数目减少，超微结构受 损；雌激素补充治疗能改善病理损伤，减少神经元的丢失。 3．SAMP8小鼠去卵巢后，雌激素缺乏导致海马·CAl 区nNOS阳性神经元减少；雌激素补充治疗能增加nNOS阳 性神经元的表达。 关键词：雌激素；海马；nNOS阿尔茨海默病；SAMP8 小鼠 英文摘要 Effectsof on functionsand estrogencognitive CA1neuronsinSAMP8 hippocampus mouse ABSTRACT obj theeffectofOvariectomizedand ective：Observing on and estrogenreplacement therapylearningmemoryability and neuronsandthenNOS in neurons hippocampal positive senescenceaccelerated