高效液相色谱讲义73645.pptVIP

2、流动相的离子强度 四、离子交换色谱的影响因素 1、填料孔径的影响 2、柱长的影响 3、流速的影响 4、PH值的影响 无论在强的还是弱的阴离子交换柱上，蛋白质 均显示不同PH值影响结果，因此决定了它的保 留选择性、分离度和回收率等因素。 5、离子强度的影响 第八节 体积排阻色谱法 一、分离机理 1、体积排阻色谱法（SEC） 或空间排阻色谱法（SEC） 或凝胶色谱法 2、凝胶过滤色谱法（GFC） Sephadex 葡聚糖凝胶 3、凝胶渗透色谱法（GPC） 4、空间排斥理论 ① ② V0 死体积，相当于凝胶的粒间体积 Vs 色谱柱中凝胶的孔穴总体积 二、体积排阻色谱法的特点 三、体积排阻色谱法的固定相 （一）固定相的分类 1、按固定相基质分类 2、按固定相机械强度分类 （二）凝胶固定相的特性参数 1、渗透极限 2、分离范围 3、固流相比 在SEC中常将柱中凝胶孔体积中的溶剂称为 固定相，而将柱中凝胶颗粒间空隙体积中称为 流动相，而凝胶孔体积与凝胶颗粒间空隙体积 的比值称作固流相比。 4、柱效 （三）凝胶色谱柱的制备及谱图的特点 ①物理因素——影响凝胶色谱柱的性能 ② 扩大分离范围——使用两根以上的串联色谱 柱。 ③更换流动相 谱图的特点：在凝胶渗透色谱中，对不同分子量 聚合物色谱峰的谱带展宽不同于其它液相色谱。 ① 在低效排租色谱法，样品分子大小随V的增加 而