毛细管电泳76138.pptVIP

毛细管电泳法Capillary Electrophoresis, CE 毛细管电泳是带电粒子在电场力的驱动下，在毛细管中按其淌度或和分配系数不同进行高效、快速分离的电泳新技术，也称为高效毛细管电泳。 20世纪30－40年代 蒂塞利乌斯 (A.W.K.Tiselius）建立了移动界面电泳，将电泳发展成分离技术 获得1948年诺贝尔化学奖 第15章 毛细管电泳法(Capillary Electrophoresis, CE) 15-9-1 毛细管电泳的原理 15-9-2 分离模式 15-9-1 毛细管电泳的原理 1 装置 毛细管 数据处理 电极 检测器 电极 试样 缓冲液 缓冲液 高压电源 （可高至30KV）  进样方法1 电动进样 也称电迁移进样. 方法:将毛细管的进样端插入装有试样溶液的试样管中，试样管中插入电极，与检测端的缓冲液间施加进样电压，并维持一定时间，试样溶液在电泳和电渗流作用下进入毛细管，然后再将试样溶液换成载体缓冲液，电泳即可进行。 进样方法2 流体动力学进样 也称为虹吸进样、重力进样、压差进样 方法:毛细管进样端插入试样溶液容器，通过进样端加压，或检测端出口减压，或调节进样端试样溶液液面大于出口端缓冲液液面高度，利用虹吸现象，使进样口端与出口端形成正压差，并维持一定时间，试样在压差作用下进入毛细管进样端，再把进样端放回缓冲液液槽中，进行电泳 检测方法 检测器 检出限（mol/L） 特 点 UV－可见吸收 10-5－10-6 近似通用，常规应用 荧光 非相干光诱导 10-7－10-8 灵敏，但试样通常要衍生 激光诱导 10-10－10-12 高灵敏度，价格昂贵，要衍生化 电化学 ? 电导 10-5－10-7 通用性 安培 10-8－10-9 选择性，灵敏度高，微量 质谱 10-7－10-9 仪器复杂，可获结构信息， 质量灵敏度高 放射 10-9－10-11 灵敏度高，操作有特殊要求 2 电泳和电渗 电泳 是指在电场作用下，溶液中的带电粒子作定向移动的现象。  电渗 是指在电场作用下，毛细管或固相多孔物质内液体沿固体表面移动的现象。 电渗与固液界面的双电层有着密切的关系 在毛细管壁双电层的扩散层中的阳离子，相对于毛细管壁的负电荷表面，形成一个圆筒形的阳离子鞘，在电场作用下，溶剂化了的阳离子，沿滑动面与紧密层作相对运动，携带着溶剂一起向阴极迁移，便形成了电渗流（electroosmotic flow ,EOF）。 15-9－1 毛细管电泳的原理2 电泳和电渗 电渗流的流型特点 电渗流 HPLC 塞流 层流 2 电泳和电渗