HRM在水产领域中应用.pptVIP

HRM在水产领域中的应用 内容提示 1 高分辨熔解曲线(HRM)简介 2 HRM在水产领域中的应用 3 问题与展望 HRM技术的发明 HRM技术是由美国犹他大学保健科学中心病理学部Carl Wittwer实验室与美国Idaho公司于2003年共同合作开发出来的新技术，并于2006成功生产出世界上第一台商品化的HRM仪器HR-1。 Luming Zhou 什么是HRM？ 高分辨率熔解曲线（high resolution melting，HRM）是通过饱和染料监控核酸的熔解曲线变化进行分析的一种技术。它是在实时荧光PCR基础上发展起来的一种新的实时定量新技术。 饱和荧光染料 LC Green plus —— 高分辨溶解曲线常用荧光染料 高分辨溶解曲线结果 HRM分析流程 PCR:在反应前加入LC Green荧光染料 时间大约2小时（包含试剂准备） 在LightScanner上进行高分辨溶解曲线分析 大约需要5-10 分钟 数据分析和处理 大约需要5-10 分钟 如果需要，PCR产物可以直接进行下游的测序分析等 大约需要30-60分钟 2005 LightScanner 96/384 96/384 孔板 ~8 分钟/板 ~2-6 秒/样品 温度均一性：? 0.15oC 数据采集速度：大于100pts/秒 升温速度： 0.1oC/秒 2010 LS32