白黄小脆柄菇和阴沟肠杆菌跨界融合条件优化及融合子SEM形态.pdfVIP

2012V01．31No．6 Science＆Technology Paper (2)响应面优化实验 l材料与方法 1．1 材料 理，选取PEG浓度、反应时间、反应温度三个对原生 菌种：阴沟肠杆菌(En把r06口c衙C如口c口e)和白黄质体融合影响显著的因素，采用三因素三水平的响 小脆柄菇(风口t|lIⅣZ缸c口，ldDZkM(Fr．)A．H．应面分析方法，在单因素实验结果基础上选取合适 Sm汕)，由华南理工大学制浆造纸工程国家重点实 的因素水平。 验室提供。 1．2．3融合子筛选 1．1．2试剂与溶液 将原生质体融合后的菌落采用划线、涂布多次 原生质体融合实验中使用的硫酸链霉素和制霉 进行双抗生素培养基平板筛选纯化，根据融合异核 菌素为广州市齐云生物技术有限公司产品；其他的 子会在双抗生素培养基上生长而原亲本菌株和自身 NsM缓冲液、CaCl2溶液、EDTA液、磷酸缓冲液融合