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- 2015-12-28 发布于江苏
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子粉(0.375
mg/mL、0.75mg/lIlL、1.5mg/mL)作用24
h。同时设置空白调零组(不加细胞加入等
量的生理盐水),以及阴性对照组(加细胞加入等量的生理盐水)。药物作用结束前30min,各孔加
入CcK一8溶液0.01m1,继续培养30
孔吸光度(A)值,每个样品设3个平行孔,实验重复3次。
4.形态学规察:取O.5ml浓度为2×10。/L的HeLa细胞悬液接种于载玻片上,培养24h后,加入
蝉拟青霉孢子粉(1。5mg/mL)处理24h后,用PBs洗3遍,3.7%多聚甲醛固定,DAPI染色5min,
荧光显微镜(oLYMPUS,BX5lTF)下观察细胞形态学变化
B
5.RT-PCR检测HeLa细胞中cathepsinmI诅她的表达:用Trizol试剂提取总心A,按说明书操作。
取3 ul
ugRNA进行逆转录合成cDNA,然后取l
计特异性引物。CathepsinB上游引物:57.cGCCCGAATTC徽GGAGCA驴37,下游引物:
7
5’一TCGACcGCATCGAAA
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