河南省番茄黄化曲叶病病原分子鉴定及其变异研究.pdf

摘要 摘要 番茄黄化曲叶病毒是一种以烟粉虱为媒介传播的双生病毒，它引起的番茄 黄化曲叶病是严重威胁番茄生产的一种流行病害，其症状主要表现为植株矮化、 叶片卷曲、叶边缘黄化等。该病在2002年传入我国南方省份；2005年以后， 特别是最近几年，在我国广西、浙江、江苏、山东、河北等地暴发流行；2007 年9月扶沟县夏秋茬大棚番茄上发生黄化曲叶病，这是该病在河南省首次发生； 2009年秋季该病在河南暴发，严重影响了番茄的产量和质量。 本研究对河南省16个番茄主产地区植株病样进行采集，提取叶片总DNA， 并根据已报道病毒外壳蛋白基因保守序列设计简并引物，进行PCR扩增得到 果发现：河南省16个番茄主产地区的番茄叶片总DNA含有病毒保守基因序列， 说明已全部被烟粉虱传播的番茄黄化曲叶病毒侵害感染，且它们之间的同源性 非常高，达到99．7％。 由于16个番茄主产地区病毒基因保守序列同源性非常高，可以确定是由同 一病毒感染引起。以滑县样品为例，进行病毒全长测定。设计一对相邻背向引 物，以番茄叶片的总DNA为模板，用PCR方法扩增病毒全基因组DNA-A的全序 列。通过对DNA-A全基因组的扩增、回收、连接、转化、筛选、鉴定及序列分 析发现，病毒基因组全长为2780nt，含有6个开放阅读框：病毒链编码AVl和AV2， 茄黄化曲叶病毒全长的同源率均大于92％，其中与山东分离物DNA-A的同源率 最高，达到99．4％。 的总DNA进行扩增，发现病毒只有中牟分离物的样品中含有DNAfl，该成分 提高了寄主内病毒DNA分子的侵染能力。 关键词：番茄黄化曲叶病毒病原分子鉴定同源性分析DNAIB Abstract 豇记昀lc邑tt锄Cal]SeTomato leafcuffdisease isaseriousdiseasefor yellow OTLCD)which The and tomato珥Ⅸh五ontypidsymptc黜inch】deseverely sh嘲Ⅷ删curlingyellow TYILW broke wingakinmar衄Fhstly wm印犯ad幻踟哑I均mp翻斑髓ofOdm；璋阳呶it outin thediseasebrokeoutinHcmnin2009．Thisdisease w笛a tomatoand serious如叩蔽011yield qlal咄 mnedand CPFCPRwas tothe脚ed designedaeeording sequmeeof∞缸珥。妇弹of n删Thenthe cloned 770bp向倒w鹤曲嘧l。dbyP氓皿)oe由配P氓田地赡阳e intothe vector irdicatedalltomato froml6dislricls pMDl8-T．Sequ∞ceanalysis planlssampled inHeronhavebeeninfectedbyTheyshare99．7％rmaolo餐,． wilhlhe CPR／CPF A∞嘎ding幻位mdoo出le∞嘤腑0flbc77