C6%2fIL-24对鼠脑胶质瘤预防作用研究.pdf

中文摘要 C6／I L-24对鼠脑胶质瘤预防作用的研究 摘 要 目的：脑胶质瘤是中枢神经系统常见疾病之一，肿瘤呈 浸润性生长，与脑组织分界不清，故单纯手术很难做到彻底 切除，同时脑胶质瘤放射敏感性差，并且由于血脑屏障的存 在，对化疗药物亦不敏感。正是由于上述原因，脑胶质瘤的 临床治疗效果不甚满意，虽然经过多年的努力，但整体患者 生存期短，肿瘤反复复发，造成病人生活质量明显下降。近 年来，随着环境变化和诊断技术的不断发展、普及，脑胶质 瘤患者呈现上升趋势，日益成为严重威胁人们健康的难治性 疾病。随着现代分子生物学的不断发展，人们对脑胶质瘤的 认识不断提高，学者们逐步开始探索运用基因技术对脑胶质 瘤进行干预。 ． 人体的免疫系统可消灭外来抗原、清除体内产生的衰老 细胞及异常增殖的肿瘤细胞，而肿瘤在体内得以形成的原因 是体内的部分肿瘤细胞具有逃逸免疫监视的功能，故目前基 因治疗的研究着重于免疫基因治疗，即将免疫活性物质(如 细胞因子)的基因导入肿瘤细胞内。转染了细胞因子基因的 肿瘤细胞，不但能分泌细胞因子发挥免疫调节和直接抗肿瘤 作用，而且该肿瘤细胞的致瘤性降低，免疫原性增强，使肿 瘤细胞表面所有潜在的肿瘤相关抗原均有可能被加工和提 呈，诱导特异的抗肿瘤免疫，从而克服肿瘤细胞的免疫逃逸 机制。然后将此种经过修饰的肿瘤细胞注射至肿瘤瘤体内或 机体的皮下，以使肿瘤局部产生具有抗肿瘤效应和有免疫调 中文摘要 节活性的物质，调节机体的免疫系统，杀伤肿瘤或抵抗肿瘤 的发生和发展，对肿痫进行治疗和预防。 发现的只有细胞因子特性和抑瘤因子功能双重功效的蛋白 质。关于lL一24对肿瘤细胞生长的影响，有研究注意至0，随 着恶性黑色素瘤的形成、进展和转移，IL．24在细胞t}-的农达 逐渐下降；而经7}三长抑制和分化诱导等方浊治疗该胂瘌后， IL．24的表达可再度上升，因此认为IL．24基因具有抑癌基 因的特性，与抑制肿瘤的生长，诱导肿瘤逆转和分化有灭。 而且当『fJ质粒或腺病毒载体将IL．24基因转入乳腺癌、肺癌 等细胞株后，可选择性诱发肿瘤细胞的凋亡。外源性lL。24基 因还可通过抑制肿瘤局部新生血管的形成，达到抑制肿瘤生 长的目的。 本实验于SD大鼠的皮下注射C6／IL．24细胞(通过逆转 录病毒将IL．24导入C6胶质瘤细胞内构建)，然后颅内种植 C6细胞，建立SD人鼠脑胶质瘤模型，观察其对人鼠腑胶质 瘤的免疫预防效果。 方法：C6鼠脑胶质瘸细胞系出河北医科人学第四医院科 研中心保存并提供。C6／IL．24细胞系河北医科人学基础所细 胞生物室建立、保存并提供。纯种SD大鼠(平均体重 250．3509)，雄性，常规喂养，由河北医科大学实验动物中心 提供。 实验动物的分组 ， 将24的SD大鼠随机分为两组各12只，～组为实验组， 一组为对照组，在每组中，6只用于观测肿瘤大小，另外6 只用于观察存活肘问。 中文摘要 实验动物的干预 注射同等体积的生理盐水。28天后，两组均下对侧颅内接种 C6细胞。 动物模型制作术前12h大鼠禁食禁水，用O．4％戊巴比 妥钠(10ml／kg)]]复腔麻酐后，固定予立定向仪匕剪去头顶部毛 1．5cm×1．5cm，常规消毒、铺无菌巾，切开头皮，暴露颅骨，在前 的小孑L。不可伤及硬脑膜，将连接于定位仪上的微量注射器的 针尖调符至触及硬腑膜，进针6mm，后退lmlTl，使针尖距硬肭膜 为5mm。将细胞恳液20pl(约106细胞)缓慢注入脑内，注射 时间为10min，留针5min后，缓慢退针。用骨蜡封闭骨孔，生理 盐水冲沈术野，缝合皮肤，切口消毒，常舰饲养。 MR检；191,Jtl,t问和办法所有甲组人鼠分别丁按种后7人、 14天、2l天进行MRJ枪奁，观察实验丈鼠的肿瘤7t长t占况， 层厚2mm，冠状面Tl加权扫描。扫描前腹腔注射造影剂GD DTPA