HIF-1a和COX-2蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义.pdfVIP

HIF．1 Q幂ncox．2蛋白在非小细胞肺癌 中的表达及临床意义 摘 要 正常肺组织中的表达，初步探讨它们在非小细胞肺癌(NSCLC)的 发生、侵袭和转移中的作用。方法：用免疫组织化学SP法检测30 为手术切除获得，术前患者未作任何放疗或化疗。30例正常肺组织 作对照。将组织标本经10％福尔马林固定，石蜡包埋，常规49in连 续切片。将石蜡切片常规脱蜡至水后，蒸馏水冲洗，磷酸盐缓冲液 buffer (phosphate 过氧化氢甲醇液9呼育10rain以消除内源性过氧化酶活性。用正常山羊 血清封闭交叉反应引起的非特异性着色。滴加一抗(HIF．1et兔抗人 多克隆抗体的稀释度1：200；COX一2兔抗人多克隆抗体稀释度l：50) 孵育，PBS冲洗后，用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照。滴加生物素 标记二抗孵育，PBS冲洗后滴加辣根酶标记链酶卵白素工作液 复染，酸化，蓝化，梯度脱水，透明，封片，显微镜观察。注意控制 背景。以细胞浆或者细胞核内出现棕黄色颗粒或者棕黄色团块为阳性 细胞。HIF．0c的阳性信号主要位于细胞核中，部分位于细胞浆中，