猪繁殖和呼吸综合征病毒ORF3和ORF5基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达.pdf

摘要 猪繁殖与呼吸综合征是一种严重危害养猪业的传染病，主要引起母猪繁育障碍和仔猪及生 长猪呼吸系统疾病。PRRSV是一种有囊膜的单股正链RNA病毒，含有8个开放阅读框，其中 由ORF3编码的GP3蛋白是PRRSV的次要结构蛋白，在毒株间保守性差，在病毒的致病性、 病毒复制、病毒装配、病毒变异和保护性等方面可能具有重要意义。由ORF5基冈编码病毒的 糖基化包膜蛋白(E蛋白)，是主要的结构蛋白，参与细胞免疫与体液免疫，刺激机体产生中和 抗体。冈此研究ORF3、ORF5基冈的克隆及表达，对于研制新型疫苗和特异诊断抗原具有重要 表达载体中，在昆虫细胞Sf9中表达，为后续试验奠定了基础。具体操作如下： 99．0％；推导的编码氨基酸的同源性为86．7％～98．8％、85．6％98．5％。 A中，获得重组转座载体 2．将ORF3、ORF5分别克隆到杆状病毒表达载体pFastBac¨ⅥHT Sf9昆虫细胞，获得重组病毒。PCR鉴定证实目的基因片段已重组到杆状病毒基因组中；间接 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒，ORF3基因，ORF5基因，克隆，杆状病毒表达