猪繁殖和呼吸综合征病毒全基因组分子遗传特征分析.pdf

中文摘要 本研究用猪肺泡巨噬细胞(PAMs)从河北地区猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪场和发病猪 场猪血清样本中分离到2株猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine and reproductiverespiratory syndrome 技术及RT-PCR技术，分段设计引物分别扩增并克隆了2个分离毒株的所有cDNA片段，测序后 均为美洲型PRRSV．进一步利用GenBank中其它国内外分离毒株的已知序列，用各种分子生物 学软件对分离毒株的基因组分子遗传特征进行了生物信息学分析。 免疫荧光抗体技术在接毒细胞的细胞浆中观察到了特异性的免疫荧光。2株病毒的第二代毒的 TCIDso分别为l 阳性血清与等体积超离样品作用后进行负染，电镜观察到了大小约60nm的病毒粒子。 2．利用分离毒株的第二代细胞毒，采用5’Full RACE技术及RT．PCR方法，分段设计引物， 成功扩增出PRRSV pGEM-Teasy质粒载体，对鉴定为阳性的重组质粒进行测序，经序列拼接获得2个分离毒株的全 编码12个氨基酸的36个核苷酸缺失．结构蛋白