L-Dopa对大鼠脑5-HT能神经元影响的实验的分析.pdfVIP

英文摘要 英文缩写 5-HT serotonin 5羟色胺 DRNdorsal nucleus 中缝背核 raphe DRDdorsal 中缝背核背侧部 raphenucleus，dorsalpart DRVdorsal nucleus，ventral中缝背核腹侧部 raphe part DRVLdorsal raphenucleus，ventrolateral part中缝背核腹外 侧部 L-Dopa 左旋多巴 levodopa PD parkinson’disease 帕金森病 TPH tryptophan 色氨酸羟化酶 hydroxylase 中文摘要 L．DOPA对大鼠脑内5-HT能神经元影响的实验研究 摘 要 目的：帕金森病(Parkinsondisease，PD)即震颤麻痹 (paralysisagitans)，是中、老年人常见的慢性神经系统变性疾 病，发病率位居老年神经系统退行性疾病第2位。左旋多巴 前体。L—DopaJ莲入脑后转化为DA，可以改善帕金森病的运 动障碍。近年发现帕金森病患者常伴有明显的抑郁症状。引 起PD病人产生抑郁症状的原因很多，其中L．Dopa的毒副作 用有可能是造成或加重抑郁症状的原因之一。L．Dopa处理 可诱发实验动物的氧化应激状态，使黑质致密部羟自由基形 成增加、纹状体脂质过氧化水平增高以及DA氧化代谢产物 形成增多，这些在损害黑质多巴胺神经元的同时，也可能损 害5．HT神经系统，导致或加重帕金森病患者的抑郁。已有研 究表明抑郁与5．羟色胺(5-HT)能神经元的功能障碍密切相 关。本实验在以往的L．Dopa=}0经毒性研究的基础上，选用正 常大鼠，给予L．Dopa，探讨其对5．HT能神经元的毒性作用。 随机分为实验组和对照组，每组12只。实验组用纯度99％的 ml生理盐水，100 L-Dopa溶于1 mg／kg灌胃45天，2次／日； 对照组用1ml生理盐水灌胃45天，2次／日。免疫组织化学染 色：取实验组和对照组wistar大鼠各6只，多聚甲醛灌注30分 钟固定，取脑干下丘部位切片，分别用于5．HT和TPH免疫组 mol／L 织化学染色，部分用于阴性对照，切片经0．01 PBS液 中文摘要 8000)，卯H(1：1000)，4。C孵育48h，加生物素标记的第 二抗体，室温孵育2h，加辣根过氧化物酶溶液，室温孵育1h， 每步问均以0．0lmol／L 液呈色5分钟后中止反应，贴片、封片。流式细胞学检测： 取实验组和对照组wistar大鼠各6只，直接断头取脑，取脑干 下丘部位脑组织，将组织块放入铜网上。先加少量生理盐水 冲洗，然后用眼科剪刀将组织块剪碎并研磨，边研磨边加生 理盐水，制得组织匀浆，过滤后离一t：,500．800转×3分钟。 去上清，取细胞悬液加抗体，上流式细胞仪检测5-HT和 TPH表达量的高低。 结果：l免疫组织化学染色显示：(1)正常大鼠脑干 5-HT能神经元主要集中在中脑下丘阶段。低倍镜