耐药基因型检测.docVIP

作业指导书 第1页 共4页 文件编码： 第1版 第0次修改 文件名称：耐药基因型检测操作规程作业指导书 颁布日期 2007年01月07日 耐药基因型检测操作规程作业指导书 目的 本操作规程是关于使用in-house方法进行耐药性检测过程标准操作和结果分析保存的规程。 适用范围 适用于HIV-1耐药基因型测定。 职责 在使用in-house方法进行耐药性检测过程中，研究人员必须依照本标准操作规程进行操作。 作业程序 核酸提取：推荐使用QIAGEN公司QIAamp ( Viral RNA Mini Kit 提取RNA。 引物 4.2.1 扩增引物 第一轮 PCR： 外侧上游引物MAW 26 ：5’-TTGGAAATGTGGAAAGGAAGGAC-3’; HXB2 2028-2050 外侧下游引物RT21 ：5’-CTGTATTTCTGCTATTAAGTCTTTTGATGGG-3’; HXB2 3509-3539 第二轮 PCR： 内侧上游引物 PRO-1 ：5’-CAGAGCCAACAGCCCCACCA-3’; HXB2 2147-2166 内侧下游引物 RT20 ：5’-CTGCCAGTTCTAGCTCTGCTTC-3’; HXB2 3441-3462 4.2.2 测序引物 正向测序引物： PROS3 ：5’-GCCAA