有机合成中的生物转化.PPTVIP

第七章、有机合成中的生物转化 一， 酶制剂和酶促反应介质 将生物催化剂应用于有机合成是目前最吸引人的研究领域。有机化合物的生物合成和生物转化是一门以有机合成化学为主，与生物学密切联系的交叉学科，它也是当今有机合成化学的研究热点和重要发展方向。 酶不仅在生物体内可以催化天然有机物质的生物转化，也能在生物体外促进天然的或人工合成的有机化合物的各种转化反应，并且显示出优良的化学选择性、区域选择性和立体选择性。 1. 酶制剂 在酶催化的化学反应中，可以使用高纯度的酶，也可以使用比较便宜的低纯度的粗酶制剂。 酶制剂中酶分子的状态可以是游离状态或是固定化状态。 A:游离酶，b：修饰酶，c：微团酶，d：固定化酶。 酶制剂的来源 酶 天然的 人工的 动物、植物和微生物 化学的 生物化学的 细胞 酶 固定化 化学修饰 抗体酶 基因工程酶 2，酶活力的测定 1）酶活力：又称为酶活性，一般把酶催化一定化学反应的能力称为酶活力，通常以在一定条件下酶所催化的化学反应速度来表示。 因此酶活力可用单位时间内单位体积中底物的减少量或产物的增加量表示，单位为mol/min等 2）酶活力单位：一般用活力单位U(Unit)表示，许多酶活力单位都是以最佳条件或某一固定条件下每分钟催化生成一微摩尔产物所需要的酶量为一个酶活力单位。 3）酶的比活力：是指每毫克酶蛋白所含有的酶活力单位数，它是酶制剂纯度的一个指标。 4）酶的收率：指纯化过程中酶活性的收率。 5）纯化倍数：指提纯后与提纯前酶比活力的比值。 3． 酶促反应的介质 水是酶促反应最常用的反应介质。 但是，对于大多数有机化合物来说，水并不是一种适宜的溶剂. 因为许多有机化合物在水介质中难溶或不溶。 而且，由于水的存在，往往有利于如水解、消旋化、聚合和分解等副反应的发生。 （2）非水介质 用某些有机溶剂代替一部分水（不是全部），许多酶仍然能够保持其催化活性，并显示出一些重要特性。 4.有机溶剂中酶促反应的特性 (1)酶在有机介质中由于水分子的减少，相对来说酶分子的构象表现出比水溶液中更具有“刚性”特点。因而使通过选择不同性质的溶剂来调控酶的某些特性成为可能。 例如在有机溶剂中，可以利用酶与配体的相互作用性质，诱导改变酶分子的构象，调控酶的底物专一性,、立体选择性和手性选择性等。 (3) 由于引起酶变性的许多因素都与水的存在有关, 因此在有机介质中酶的稳定性得到显著提高。 (5) 在有机介质中进行的酶促反应，可以省略产物的萃取分离过程, 提高收率。 (6) 脂溶性底物和产物在有机溶剂中的高度溶解性, 有利于提高底物浓度总的水平。同时由于底物和产物的高脂溶性，使它们在酶分子表面的实际浓度较低, 可以减少底物或产物对酶引起的抑制作用。 (7)在有机溶剂的存在下，一般不存在微生物污染问题。 (8) 由于酶不溶于有机溶剂中，所以是一个非均相反应体系。应用振荡或搅拌改善底物及产物的交换是反应的关键。 酶催化反应的某些缺点 1, 酶催化反应只能得到一种构型（L-型或D-型）的光学产物； 2，酶常常存在着底物或产物抑制现象，造成反应转化率降低，生产能力低等问题； 3，极端的pH、较高的温度和高盐浓度的反应体系都可能使酶钝化，失去部分甚至大部分催化活性； 4，大量的氧化还原酶、转氨酶等需要等计量反应物的辅因子存在才能表现催化活性，从而限制了它们在许多有机合成反应中的应用； 5，酶通常在水溶液中实施其催化活性，对于大多数有机化学反应来说，使用的溶剂是非水溶性的有机溶剂。 目前以酶在非水相中研究中所涉及的酶类主要有脂肪酶、过氧化物酶、漆酶、酯酶、脱氢酶、蛋白水解酶 (胰凝乳蛋白酶、木瓜蛋白酶) 等，并迅速产生了一个全新的分支?非水酶学。 现在非水酶学方法在多肽合成、聚合物合成、药物合成以及立体异构体拆分等方面显示出广阔的应用前景。 5. 酶促反应的有机溶剂体系 (1) 与水互溶的有机溶剂?水单相体系 有机溶剂与水形成均匀的单相溶液体系。酶、底物和产物都能溶解在这种体系中。 (2) 非极性有机溶剂?水两相体系 由含有溶解酶的水相和一个非极性的有机溶剂(高脂溶性)相所组成的两相体系。 (3) 非极性有机溶剂?酶悬浮体系 用非极性有机溶剂取代所有的大量水，使固体酶悬浮在有机相中。但仍然含有必需的结合水以保持酶的催化活性(含水量一般小于2%)。 酶的状态可以是结晶态、冻干状态、沉淀状态，或者吸附在固体载体表面上。 反向胶束体系 超临界流体 无溶剂反应体系 6，有机溶剂中影响酶催化性质 的各种因素 水的作用 pH状态 溶剂对酶催化活力的影响 酶的固定化 酶的修饰 添加物对酶催化反应的影响 生物印迹 为了维持酶分子的构象和酶的催化活性，酶分子的周