维生素d与糖尿病联系.docVIP

项 目 名 称：维生素D对II型糖尿病的影响 一、立题依据及意义（国内外研究现状、水平和发展趋势；创新之处和主攻关键） 1、关于2型糖尿病 糖尿病 （diabetes mellitus）是一种在遗传和环境因素长期共同作用下，由于胰岛素分泌绝对或者相对不足所导致的渐进性蛋白质、脂肪、水和电介质代谢发生紊乱的一系列综合征，其中以高血糖为主要标志。 随着人们的生活水平的提高、生活方式和饮食结构的变化以及人口老龄化，糖尿病的发病率呈逐年上升趋势，目前已成为最常见的慢性病之一。而2型糖尿病（非胰岛素依赖性糖尿病，insulin-independent diabetes mellitus，NIDDM）Clinical progress in studies on vitamin D and type 2 diabetes的文章指出：研究发现维生素D与2型糖尿病的发生关系密切.低维生素D血症的人群中2型糖尿病的发病率明显增高The potential to improve diabetes control with vitamin D replacement in African American patients: case report and literature review文章提到非籍美国黑人患NIDDM的比例较高，同时他们的维生素D缺乏率也很高，而补充维生素D对他们的NIDDM也存在一定的治疗作用。 3、 Vd可能与NIDDM有关的作用 1) 维生素D在代谢综合征中有重要作用，具有改善胰岛素敏感性作用的潜力。 2) 维生素D可以令人体免疫系统保持健康，保护人体细胞免遭损坏，如产生胰岛素的胰腺细胞。 3) 肥胖人群中2型糖尿病发生率增加，也和维生素D有关：一方面，维生素D易于在人体脂肪沉积，但不再具有生物活性；另一方面，维生素D可以调节脂肪细胞储脂作用,加重肥胖。而肥胖会增加NIDDM发生的可能。 4、创新之处及目的 目前，关于2型糖尿病的研究有很多，但大多数都是研究如何治疗的。如果可以通过一些简单的方法来预防它在人群中的发生，效果将更好。从以上的介绍中可以看出维生素D与2型糖尿病的发生似乎存在一些关系，所以，针对这一问题，我们小组设计了这项实验，来探索维生素D对NIDDM的发生究竟有什么作用。我们猜想不同浓度的维生素D对机体的作用不同，大剂量维生素D或维生素D缺乏都可能会促进NIDDM的发生，而少量的维生素D会减少NIDDM的发生。如果结论得到证实，那么，对易于发生维生素D缺乏或过多的人群相应的补充或降低维生素D的摄入，将对这类人群NIDDM的发生起到一定的预防作用。 二、技术路线（动物、药品、仪器设备、实验方法） 实验动物：120只健康雄性小鼠（实验在相对较暗的环境中进行） 药品：STZ（链佐脲菌素，Streptozotocin）、1,25-(OH)2D3、柠檬酸盐缓冲液、花生油、肝素、 仪器设备：哺乳动物手术器械一套、注射器、试管、便携式血糖仪、SDS电泳仪和转膜仪摇床离心机 糖尿病组 少量补充Vd组 大量补充Vd组 对照 1—4 隔日腹腔注射花生油（5μg·kg-1），共14次 隔日腹腔注射1,25-(OH)2D3（2μg·kg-1），共14次; 隔日腹腔注射1,25-(OH)2D3（5μg·kg-1），共14次; 隔日腹腔注射花生油（5μg·kg-1），共14次 4 连续7d腹腔注射STZ（20 mg·kg-1） （与上面操作间隔6小时） 连续7d腹腔注射STZ（20 mg·kg-1） （与上面操作间隔6小时） 连续7d腹腔注射STZ（20 mg·kg-1） （与上面操作间隔6小时） 连续7d腹腔注射与糖尿病组等容量柠檬酸盐缓冲液（与上面操作间隔6小时） 4—9 喂食高热量食物，每周末测血糖 喂食高热量食物 喂食高热量食物 喂食正常食物 9 每天测尿量和饮水量 每天测尿量和饮水量 每天测尿量和饮水量 每天测尿量和饮水量 9周后，各组小鼠空腹8小时后，测糖耐量。之后，断尾取血用便携式血糖仪检测血糖水平；采集血清用胰岛素ELISA 检测试剂盒检测血清胰岛素水平；采集肝脏标本利用细胞免疫组化及Western blot法检测胰岛素受体（IR）的表达情况；采集胰腺标本利用Western blot法检测胰岛细胞Bax和Bcl-xL蛋白表达水平；取胰腺制作标本，观察胰岛B细胞损伤情况。 记录实验结果,并分析. 2、 实验数据表格 组别 平均水平 糖尿病组 少量补充Vd组 大量补充Vd组 对照 饮水量(ML) 尿量(ML) 糖耐量 血糖(mmol/L) 胰岛素含量 IR Bcl-xl Bax 胰岛B细胞损伤情况 3、 理想结果 数据处理结果存在具有统计学意义，则结果说明Vd确实对2型糖尿病的发生有所影响。 饮水量与尿量