皮芯结构的丝素己内酯纤维 及其双层血管再生支架.pdf

皮/芯结构的丝素/聚己内酯纤维及其双层血管再生支架 中文摘要 皮/芯结构的丝素/聚己内酯纤维及其双层血管再生支架 中文摘要 当人体某部位的血管由于动脉硬化、血栓、老化或破损等原因不能正常供血时， 需要血管置换、搭桥等外科手术的治疗。其中，小口径血管（内径小于6 mm ）因易 发生栓塞而没有理想的替代品应用于临床。以血管再生支架为基础的体内血管再生是 治疗血管疾病的可能途径，研制和开发具有诱导血管组织新生的血管再生支架是临床 的迫切需求。用静电纺丝法制备的丝素（SF）纤维具备用作血管再生支架的潜力。若 能进一步调控SF 纤维及支架的力学性质，并提高其引导细胞和组织生长的模板功能， 则其有可能满足小口径血管体内再生的需要。本文采用同轴静电纺丝技术以聚己内酯 （PCL ）为芯层增强SF 纤维的力学性能，研究纺丝条件与皮/芯结构纤维（C-SF/PCL） 包覆率之间的关系；在C-SF/PCL 纤维网表面培养血管细胞，研究纤维网的结构与纤 维表面成分对细胞粘附及增殖的影响；用肝素对C-SF/PCL 纤维进行抗凝血改性，系 统性地评价肝素化纤维网的血液和细胞相容性；在此基础上，制备疏、密双层结构的 小口径管状支架，并通过将其移植于动物体内血管缺损部位的实验，探讨双层支架促 进血管组织再生的活性和机制。 首先，采用同轴静电纺丝技术制备了皮/芯结构的C-SF/PCL 纤维，并通过调整皮 /芯溶剂的相对挥发速率调控纤维的包覆率，研究表明：当芯层溶剂的挥发速率略高 于皮层溶剂时可以制备出较高包覆率的 C-SF/PCL 纤维。PCL 作为芯层既保持了SF 的生物活性，又增强了SF 的力学性质，细胞在C-SF/PCL 纤维支架上的粘附和增殖 与纯SF 支架相似。用C-SF/PCL 纤维制备血管再生支架比单一组分及两组分混合纤 维更具力学性能和细胞亲和性的综合优势。 其次，采用滚筒同时接收C-SF/PCL 和聚环氧乙烷（PEO ）纤维，经滤沥除去PEO 2 纤维以增大纤维网内的孔隙，制备纤维取向且具有大孔（约为525 μm ）的纤维网。 研究表明：由于纤维取向的影响，纤维网在横纵两个方向上的拉伸性能明显不同，并 且通过无序纤维层与有序纤维层的复合，可以调节复合纤维网的力学性质。以纤维取 向且有大孔的C-SF/PCL 纤维网作为支架进行平滑肌细胞培养，细胞能够沿着纤维的 排列方向取向增殖及生长，并且由于纤维网孔的增大，平滑肌细胞能够迁移至纤维网 内部。 I 中文摘要 皮/芯结构的丝素/聚己内酯纤维及其双层血管再生支架 然后，利用碳化二亚胺（EDC ）可激活羧基的特性，将肝素共价结合到C-SF/PCL 纤维的SF 分子侧链上，其结合量可达9 wt.%左右。肝素钠在最初1 天内有突释，随 后能稳定的释放，14 天的累积释放量为34%左右。血小板粘附以及溶血率 （1.9%） 实验表明，经肝素改性后的纤维网具有抗凝血性。在经改性的纤维网上，内皮细胞能 够更好地粘附和增殖，同时也能够明显抑制平滑肌细胞的生长和增殖，这有益于作为 血管再生支架时维持体内组织环境的稳定。 进一步，通过转轴接收静电纺丝及滤沥法构建了小口径血管支架。支架内径约为 2 mm，壁厚约为650 μm ，由疏、密排列的两层纤维组成，其中内层为紧密、均匀、 无序排列的纤维，外层为疏松、均匀、取向排列的纤维，从而形成了有功能性分区的 血管支架。该支架的径向和轴向拉伸断裂强度分别约为5.6 MPa 和3.6 MPa，径向及 轴向断裂伸长率分别约为88%和140%，缝合强度及爆破压分别为1.8 N 和3.4 MPa， 满足临床对血管再生支架力学性能的要求。 最后，采用端端缝合法用长2 cm 的双层血管支架置换兔颈动脉，术后动物伤口 愈合良好。血管支架能够承受血流的冲击，多数能在实验期内保持通畅。血管支架能 良好地与周围组织融合。HE 染色结果显示支架在体内无明显的炎症细胞浸润，材料 所引起的免疫应答和炎症反应轻微，血管修复细胞能迁入血管再生支架的外层构建血 管组织。Masson 与Weigert 染色结果显示，随着修复时间的增加，双层支架内