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实验四.ppt
实验四 培养细胞的生长曲线测定 * 实验目的 学习培养细胞生长曲线测定的方法,观察细胞生长的基本特点和不同时相。 细胞生长曲线是观察细胞生长基本规律的重要方法,也是测定 细胞绝对增长数值的简易方法。一般在接种一定数量细胞后,每日 抽一组(至少随机取样3瓶),彻底消化收集细胞,制成悬液计数, 依逐日统计的数值绘出生长曲线,从该曲线中,可以测知细胞的倍 增时间。细胞的生长曲线一般由潜伏期(滞留期)、对数生长期和 静止期(平台期)三个不同生长时相组成。 实验原理 实验器材 仪器:相差显微镜、普通显微镜、细胞培养瓶、24孔板、 细胞计数板。 试剂:PBS、1640培养液、胰酶。 材料:Hep-2细胞系。 取细胞悬液计数,精确地接种于24孔板内,每瓶细胞总数要求 一致,接入的细胞量控制在105个/ml左右,加入的培养液的量也要一 致。每天取出3孔细胞进行计数,计算平均值,一般连续观察统计4 到5天或到细胞总数有明显减少为止,培养2至3天后要给未计数的细 胞换液。 实验方法 *
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