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王镜岩生物化学第三版课后答案3.doc
第36章 RNA的生物合成和加工
⒈比较四类聚合酶性质和作用的异同(四类聚合酶是:DNA指导的DNA聚合酶,DNA指导的RNA聚合酶,RNA指导的RNA聚合酶,RNA指导的DNA聚合酶)
答:DNA指导的DNA聚合酶是 以DNA为复制模板,从将DNA由5端点开始复制到3端的酶。DNA指导的DNA聚合酶的共同特点是:(1)需要提供合成模板;(2)不能起始新的DNA链,必须要有引物提供3-OH;(3)合成的方向都是5→3(4)除聚合DNA外还有其它功能。所有原核和真核的DNA聚合酶都具有相同的合成活性,都可以在3-OH上加核苷酸使链延伸,其速率为1000 Nt/min。加什么核苷酸是根据和模板链上的碱基互补的原则而定的。
DNA指导的RNA聚合酶(RNA polymerase):以一条DNA链或RNA为模板催化由核苷-5′-三磷酸合成RNA的酶。RNA聚合酶(RNA polymerase)的作用是转录RNA。有的DNA指导的RNA聚合酶有比较复杂的亚基结构。
RNA指导的RNA聚合酶或RNA复制酶是在某些RNA病毒中有以病毒RNA为模板催化RNA合成的酶。RNA复制酶催化的合成反应是以RNA为模板,由5′向3′方向进行RNA链的合成。RNA复制酶缺乏校对功能的内切酶活性,因此RNA复制的错误率较高,RNA复制酶只是特异地对病毒的RNA起作用,而宿主细胞的RNA一般并不进行复制。
RNA指导的DNA聚合酶是反转录酶,具有三种酶活性,即RNA指导的DNA聚合酶,RNA酶,DNA指导的DNA聚合酶。
⒉原核生物RNA聚合酶是如何找到启动子的?真核生物聚合酶与之相比有何异同?
答:原核生物RNA聚合酶是在δ亚基引导下识别并结合到启动子上的。不同类型的δ亚基识别不同类型的启动子。
真核生物RNA聚合酶自身不能识别和结合到启动子上,而需要在启动子上由转录因子和RNA聚合酶装配成活性转录复合物才能起始转录。
⒊何谓启动子?保守序列与共有序列的概念是否一样?Pribnow框与启动子之间是何关系?
答:启动子是指RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列。
保守序列与共有序列的概念的含意基本相同。保守序列间相似度高,但不一定相同,面共有序列是相同的,共有序列可理解为是一种特殊的保守序列。
Pribnow框是启动子序列的一部分。
⒋真核生物三类启动子各有何特点?
答:真核生物有三种RNA聚合酶:RNA聚合酶I、II、III,分别转录rRNA、mRNA、tRNA和小分子RNA。与之对应,有三种类型的启动子。
类型I:Ⅰ类启动子负责转录编码核糖体RNA的多顺反子转录本。脊椎动物RNA聚合酶I的启动子有两部分组成,包括转录起点附近的核心启动子(core promoter) ,和起点5’上游100bp左右的上游控制元件(upstream control element,UCE)。核心启动子从-45到+20,负责转录的起始。UCE从-180延伸到-107,此区可增加核心元件的转录起始的效率。
RNA Pol Ⅰ需要2种辅助因子:UBF1(上游结合因子1)是一个单链多肽,它可以和核心区UCE的G.C丰富区结合。SL1因子, SL1含有4个蛋白,其中之一称TATA框结合蛋白(TBP)。SL1本身对这种启动子来说并非是特异的,但一旦UBF1和DNA结合了,那么SL1就可以协同结合在DNA上。当这两个因子都结合上了RNA聚合酶才能和核心启动子结合起始转录。
类型II: RNA聚合酶Ⅱ的启动子
RNA聚合酶Ⅱ的启动子有三个保守区:
(1)、 TATA框(Hogness框)
中心在-25至-30,长度7bp左右。
碱基频率:T82 A97 A85 A63 (T37 )A83 A50(T37 )(全为A-T,少数含有一个G-C对)。
此序列功能:使DNA双链解开,并决定转录的起点位置,失去TATA框,转录将可能在许多位点上开始。
TATA框的改变或缺失,直接影响DNA与酶的结合程度,会使转录起始点偏移,因此,TATA是绝大多数真核基因正确表达所必需的。
由于RNA聚合酶分子有相对固定的空间结构,同此框的结合位点和转录反应催化位点的距离,决定了起始位点的正确选择。启动子特定序列和酶的正确结构,这两者把酶置于一种正确的构象中,决定了识别的正确性和转录起始的正确性。
(2)、 CAAT框
中心在-75处,9bp,共有序列GGT(G)CAATCT
功能:与RNA聚合酶结合。
(3)、 GC框
在CAAT框上游,序列GGGCGG,与某些转录因子结合。
CAAT和GC框均为上游序列,对转录的起始频率有较大影响。
类型III :是由不同的转录因子以不同的方法来识别的。5S RNA和tRNA都属于RNA 聚合酶Ⅲ启动子,但它们比较特殊,位于起始位点的下游的转录区内,因此也称为下游
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