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第五章 胞外产电菌 第五章 胞外产电菌 5.1 简介  5.2 电子转移的机制 5.2.1纳米导线  5.2.2 细胞-表面的电子传递  5.2.3 中介体  5.3 细菌的形态结构与生理特点 5.3.1 产电微生物的定义 5.3.2 产电微生物的类别 5.3.3 MFC产电微生物的研究进展 5.3.4 微生物群落分析 (1) 165rRNA基因文库的构建和分析方法  采用小量细菌DNA抽提试剂盒从电极提取基因组DNA。 (2) 变性梯度凝胶电泳(DGGE) 采用BSF338/BSR534引物进行DGGE-PCR图谱的电泳。 5.3.5 MFC 产电微生物的电子传递机制 　　　据研究发现产电微生物向阳极传递电子分2 步走，第1 步是电子在细胞内产生并向细胞表面传递；第2 步是电子到达细胞表面后向MFC 阳极传递。 （1） 由细胞内向细胞表面的电子传递 一些产电微生物可依靠其膜上的脱氢酶直接氧化小分子的有机酸，释放电子给细胞膜上的电子载体，另一些产电微生物可氧化糖类等稍微复杂的有机物生成NADH，然后在NADH脱氢酶的作用下，电子从NADH 转移至电子传递链，到达细胞表面的氧化还原蛋白。 （2） 由细胞表面向MFC 阳极的电子传递 产电微生物在细胞内氧化有机物产生的电子被传递至细胞表面后，被证实将会通过2 种传递机制将电子传递到MFC阳极上，1 种是电子穿梭机制；1 种是生物膜机制。 5.3.6电池的电化学性能表征 　　　在每个MFC上串联一个1 kΩ电阻，电阻电压采用万用表测量，电路电流根据电阻电压计算得到，并换算成基于MFC阳极面积(45 cm2)的电流密度。电池输出功率密度由输入电压及电流密度相乘得到。监测阳极电势时，参比电极是AgCl/Ag电极，对电极采用R电极。极化曲线实验在每次刺激后]2h进行，实验过程中分别连接10Ω至10000Ω的一系列负载电阻，每个电阻下稳定lh后测量电流及电阻电压。在测量开路电压之前，电路保持开路12h以达到稳态。 5.3.7 阳极微生物的形态及电化学活性表征 5.4 群落分析 5.4.1阴极室利用氧气的MFC 5.4.1阴极室利用氧气的MFC 　 我们需要逐一比较MFC的构型（如沉积物、非沉积物、氧气、铁氰化钾和恒电位MFC），底物和接种物（沉积物、江水和废水细菌），从而更好地理解控制了MFC系统中生物群落的进化的因素。 5.4.2除氧气外的其他电子受体MFC 在以葡萄糖为底物、用铁氰化钾作阴极的MFC中，Rabaey等应用变性梯度凝胶电泳（DGGE）技术，鉴定了生物膜中大量细菌的菌属。鉴定的序列分属于Firmicutes、Gamma –和Alphaproteobacteria。 5.4.3 沉积物MFC 虽然沉积物MFC（SMFC）的阴极存在氧气，但此系统与其他MFC的根本区别在于样机上的细菌是与氧气完全隔绝的。 5.4.4 高温MFC 少数研究者考察了正常实验室温度范围之外的MFC产电情况（温度达到36℃）。Choi等在一个MFC系统中检测出了两株嗜热菌株（Bacillus licheniformis和B.thermoglucosidasius）。但是，其能量产生需要用到中介体，所以在这个实验中使用的菌株不属于胞外产电菌。高温下的一个问题是氧气的溶解度会随着温度的升高而降低。 5.5 将MFC作为工具研究胞外产电菌 虽然研究MFC的主要目的是产电，但同时MFC也为科学家提供了一个研究胞外产电菌生态系统的有趣的新平台。当细菌降解不溶性金属时，其表面特征随时间而变化，同时，因为金属离子的氧化/还原相对浓度比例随时间的变化而变化导致了溶液化学性质变得更加复杂。然而在MFC中电极是不会被腐蚀的，允许生物膜在其上生长并成熟。 5.6 微生物驯化与鉴定 5.6.1培养液COD负荷及外电路电流对驯化的影响 　 活性污泥在新的培养体系下很难承受过大COD负荷的冲击，从而导致其微生物细菌代谢发生异常，抑制细菌代谢的正常进行，使产电菌部分失活。 5.6.1培养液COD负荷及外电路电流对驯化的影响 在初始阶段分别采用恒电流放电和恒电阻放电进行活性污泥的驯化，分别得到可两组电池性能指标 5.6.2电极材料对电池性能的影响 以20% PTFE石墨膜为阳极材料所组装的电池在开路条件下阳极电势最负，且稳定时间最长恒阻放电时其阳极电势也为最负，并且此时外电路电流最大，阳极极化较小，所以其阳极性能最好。 5.6.3外电路不同负载对电池性能的影响 驯化到出现明显放电现象过