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第五章 显微分析及微束分析
实物总以一定的形态存在,物质电子、原子、分子层次的变化都会以不同层次微观形态体现,物质的任何宏观性能或行为,都由其各层次的微观形态所决定。另一方面就同层次而言,物质的化学组成、晶体结构或组织形态,其均匀性是相对的,不均匀却是绝对的,正是这种不均匀性的组合,形成从宏观到微观各层次的万千世界。
显微分析及结合微区形态的微束分析是人类认知微观世界、研究自然科学机制、机理、本质问题最直观的途径。“百闻不如一见”“眼见为实”,都说明视觉信息的重要。
然而,人眼视觉能力有限,只有借助成像技术。从微米分辨的光学显微镜、纳米分辨的扫描电镜、隧道电镜到原子分辨的透射电镜,从常规聚焦光学成像到非聚焦扫描成像,从超声波成象到X射线计算机层析成像、核磁共振波谱成像,物质科学与图像信息科学的结合层层深入,将看不见的微观奥秘转为形象生动的图像世界。
原则上,物质中能激发的任何一种与空间相关的信息都可以成像。本章以电子光学成像技术为代表,介绍现代分析中显微成像的基本概念、仪器原理和显微分析应用。
5-1 显微学基础
显微分析技术是用显微镜作为工具直观表征物质微观形貌的方法。研究显微成像的理论、方法和技术等综合性学科称为显微学,显微学的基础是显微光学原理。
5-1-1 显微成像与视觉局限
1.图像的概念
图像是反映客观物质(及过程)与时空关联的特征信息列阵,图像的维数与客观物或其过程特征量的维数应一致。物质图像显示该物某特征量的空间分布信息。映射产生图像,图像描述客观事物或其过程。本章所指的图像,不同于前面的化学成份图谱(Spectrum)和衍射花样图相(Pattern),(Picture),而是物质真实空间的映像(Image)。
图像由象素组成,图像有两个基本要素:衬度和空间分辨率。衬度即图像对比度,也即象素值层次。没有衬度或很低,就看不见图像。图像空间分辨率,可由象素值在可分辨条件下的像元总数来表述。可分辨的像元总数越多,则反映客观物的细节越清楚。
图像空间分辨极限可定义为由图像中可分辨的两像元最小距离。
形成可视化图像必须有两个条件:一是要有传递物特征量的信息载子,如可见光、红外光、紫外光、X光、电子、中子和超声波等各种频带的电磁波、能量波和粒子束等;二是要通过适当的成像系统转化为人眼能感受的像。
客观世界中人眼不能分辨的所有细微结构总称为微观世界。显微成像技术的任务是放大微观世界的图像,使人眼能够直接观察。
2. 人类视觉的局限
人眼是精巧和相当完善的天然成像系统,它影响着最终判断图像的质量。但人眼从频率域、空间域等都有明显的局限性,所有视觉分析仪器必须针对人眼的局限性而设计。
首先人眼只能感受可见光,而可见光只是整个宇宙光波段中极小部分,绝大部分信息都是人眼不能直接获取,而要借助仪器转化成各种图像视觉,这涉及的是成像物理。
显微图像关键的是人眼的空间分辨力和衬度层次有限性。空间分辨能力即视力定义为:在照明最佳条件(约103 l x,照度单位:勒克司)下,以最小分辨角的倒数表示,即ρ=1/θ;或用在明视距离(250 mm)能分辨的最小尺度或空间频率响应每毫米线(对)数表示。
人眼的角分辨率约1’(1/60度);能分辨两点的最小距离0.2-0.1mm;线分辨率高于点分辨率,空间分辨响应最好约1-0.5(线对)/mm
从生物物理上,人眼感受图像的衬度必须大于5%,即感受灰度级别不到20级。人眼亮度响应是非线性的对数响应,亮度差别很大的图像,人眼感受并不大。
人眼对亮暗变化还存在马赫效应,对相互邻接的均匀亮度区,人眼“过量调整”为不均匀。即亮区紧邻的暗区显得比实际更暗;反之,亮区显的更亮。
另外,心理感觉上,人类视觉对不同图像、不同部位的权重、角度或主观因素不同,理解图像会不同。同一照片,正反面、顺倒向看都不同。人类视觉常常会造成假象。
总之,人眼在信息带宽、灵敏度、分辨率、定量和客观性等方面都存在局限性。
图5-1-1艾利斑和瑞利判据
3.光学分辨的阿贝公式
为了揭示物质微观世界的奥秘,人类必须借助显微镜。显微的两个核心问题:一是成象衬度;二是仪器分辨能力。按一定衬度原理设计的显微镜最重要指标是分辨率。
光学分辨率,能分辨开两点的最小距离,是由衍射效应和像差效应两类因素决定的。
光的波动性产生衍射效应,一个物点通过透镜所形成的像不是一个几何点,而是由中心亮、周围明暗相间同心环的园斑,称为艾利(Airy)斑。如图5-1-1。
两物点靠近时,像面上两个Airy斑也相应彼此靠拢。当两个中心亮斑重迭一半时,两亮峰强度与中心迭加的峰谷强度差(即衬度)G =19 %,此时人眼尚能感觉和分辨开两亮斑。如两物点进一步靠近,当它们的Airy斑重迭过于厉害,衬度下降,以致两物点图像界限模糊无法分辨。
英国科学家瑞利(Rayleigh)
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