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摘要
分予光谱法研究盎清自蛋自及壳蒙糖与染料静
相互作用及分析应用
分新纯学专巫研党生 零世星
指导教师 扬季冬教授
攘 要
荧光分析涟县有灵敏度高、选择性好,试样量少和方法简单等特点已成为一种常见的物
矮定性定量势辑方法。本文研究了蛋自质与多耪染耨豹程整稼蠲爱它{}】静巍谱褥廷。势班睾}
辫结果阐释了荧光猝灭的类趟,染料与蛋白成的作用力类型。并计算了体系的结合常数、结
食位点数和结台距离等有关参数。实验发现染料与蛋白质作用后,其荧光=猝灭程度与染料浓
璇堇线佳关系,弦琵可建立分授测定染辩静耩方法;当蔽变蜜验条辞薅蛋自鹱与菜塑染瓣佟
用会导致染料荧光增强,其增强值与蛋白质的浓度呈正比,于是可建立分析测定蛋白质的新
方法。
莛振臻荦l敬瓣往魄s)法楚遥lF来发震越来熬操作麓霞、瑟壤度裹静努予光谱势拆方法。
目前RRS法已经广泛用丁:生物,犬分子分析、咒机物和药物分析、痕量无机离子的测定和纳米
离乎的表征等方掰的研究。我们将它应用于糖类物质的分桥,建立了测定壳凝糖的RRS掰方
法,并研究7察验静条辞释彰瞬因素。方法雕乎壳聚糖翦安鼯徉箍灏定,缝莱令A满意,并
髟其它方法比较有更高的灵敏虔和选择性。
1 蛋白质.吩嗪类染料体系
在pH
(iS)、中性红(NR)和番红花红(s”吩嗪类染料发生结合反应。兰种染料均导被了蛋白质的荧光
狞灭,其荧光猝灭值与染料浓度成正比,可以虽白质为探针,铡定某些染料。由实验数据得
到举阕溢度下静瀚态猝灭常数秘静态猝灭结食常数、反癍的热力学参数翱缩合位点数。搬撂
麴Tris—HCI缓冲溶液中蛋白质慰PS荧光的增强作用。根据Ps荧光增强稷度与蛋白质浓度的
线性关系,可爝予蛋白质的禽鬣测定。研究?牛盘清自蛋融每中性红静三缭荧光兜谱,袋鹱
=者发生了能最转移,BSA将部分能虽转移绦NR。导致BSA的荧光猝灭。
两南大学硕十学付论文
2 蛋白质一二苯蒸奈基甲烷类豢辩体系
拜;荧光光谱、同步荧光光谱和紫羚吸收光谱法研究了BSA及HSA与维多利砸蓝fvB)、
维多利砸蓝B(VBB)、维多利弧菔4R(VB4R)镣二苯基萘墓甲烷类染料相互作用及光谱特征。
结聚表明染辩譬溅良质的反应母致了蛋矗质蛉荧光猝灭,萁荧光猝灭篷与VB、VBB、VB4R
温度下的动态猝灭常数和静态獬灭结合常数、反应的热力学参数和结合位点数。根据F6ster
熊鬣转移原瑾计籍窭了三静染辩与趣涛白蛋白瓣结合距裹。
3 壳聚糖.金属离子遥}自质体系
在pH
笈仓钫,导致体系辩敖射光强凌鼹簧增强。最大数射峰位予470hill左右,纛键≯305-340nm
麓右的散射峰强度最为稳定。程0,01~4.0p幽L范围内散射强度与壳聚糖浓魔晕线性关系。方
法灵敏度高,检测限为3.7ng/mL。该方法用r海虾、蟹等实际样品及胶囊中含量测定,结果
潢露。
4 壳聚糖一四碘荧光素体系
在pH4.0的BR缓冲溶液中,四碘荧光索与壳聚塘反心嫩成复合物导致拭振瑞利散射光
滋媛度增强,最犬RRS蜂霞予575
nm。研究了体系静透宣发疯条蟹及共存貔蔟鳃影薅,援攥
其线性关系建立丁测定壳聚糖的RRS新方法。线性范围魑O.1~2.o
ltg/mL,检出限为17
nUmL。方法简便、快速,重复性好。可用于壳聚糖胶囊的测定。本法与第曼体系中的研究方
法蟋有较叠翦攒遴弱荧光葬灭浚、紫羚分先必发毒更毫戆灵敏覆疑及方法鬟瑗牲好等谨蔗。
笑键词:荧光猝灭共振瑞利散射壳聚糖血清白戳白
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