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面包酵母转化大茴香醛合成手性医药中间体 闫薇薇，汤鲁宏 江南大学医药学院，江苏无锡（214122 ） E-mail ：tangluhong@ 摘 要：本文对面包酵母 Baker’s yeast, Saccharomyces cerevisiae 转化大茴香醛合成手性医 药中间体 1R -1-羟基-1- 4- 甲氧苯基 丙酮-2 L-p -MeO-PAC 和 - - 1R,2S -1-对甲氧苯基-1,2- 丙二醇（p -MeO-PPDA ）的体系进行了研究，并借助于TLC法、比色法和GC/MS法，从转化 温度、转化时间、活化时间、对甲氧基苯甲醛浓度、蔗糖浓度、助溶剂种类及浓度的选择、 乙醛浓度、酵母固定化等方面，对该两种手性化合物的合成条件进行了优化。单因素实验结 果表明：面包酵母在29 ℃，蔗糖80g/L ，活化1h, 加入乙醇4% （体积分数）和大茴香醛 0.08mol/L ，转化4h 时，产物L-p -MeO-PAC的GC含量高达19.37%，延长转化时间至14h，底 物大茴香醛转化率为98.7%，p -MeO-PPDA的GC含量达27.76%。此外对产物p -MeO-PPDA进 行了分离纯化，得到了无色针状结晶。 关键词：面包酵母，大茴香醛， 1R -1-羟基-1- 4- 甲氧苯基 丙酮-2 ， - - 1R,2S -1-对甲氧苯基 -1,2-丙二醇 中图分类号：Q81 1. 引言 大茴香醛, 学名对甲氧基苯甲醛 p -anisaldehyde, CH OC H CHO, 分子量136.15，CAS 3 6 4 No. 123-11-5 ，是苯甲醛的对甲氧基衍生物，在我国已实现工业化生产。近年来有关苯甲醛 经生物转化合成左旋麻黄素的手性前体L-苯基乙酰基甲醇 L-PAC 的研究报道颇多[1-3] 。因面 包酵母 Bakers yeast，Saccharomyces cerevisiae 廉价易得；体内有丰富的酶[4]，可作用的底 物范围广；在基因水平上比较稳定，能够保证生物转化的相对稳定，被视为一种理想的生物 催化用细胞，广泛应用于从非手性原料出发得到手性纯产物的生物转化领域。截至目前，采 用面包酵母转化苯甲醛合成L-PAC的机理及代谢途径的研究已相当成熟。 但是以大茴香醛为底物，经面包酵母的转化得到相应手性纯产物的研究目前国内尚未见 报道，国外也仅零星报道[5-7] [8] 。参照苯甲醛的生物转化机理 ，推测面包酵母转化大茴香醛 的情形见图1。1989 年，A.Long, P.James, O.P.Ward 采用面包酵母转化大茴香醛合成 1R -1- 羟基-1- 4- 甲氧苯基 丙酮-2 L-p - 甲氧苯基乙酰基甲醇, L-p-MeO-PAC ,Yield 1.2-3.4mg/ml[7], 可作为一种手性医药中间体，合成伪麻黄碱的结构类似物。2007 年，Daniela Acetti,Elisabetta Brenna 采用面包酵母转化大茴香醛合成 - - 1R, 2S -1-对甲氧苯基-1,2-丙二醇 1R,2S -1- 4-methoxyphenyl propane-1,2-diol, p -MeO-PPDA ，用作合成良性前列腺增生症治疗用手性 药物 R -坦舒洛辛 Tamsulosin 的原料[6]，以上面包酵母转化大茴香醛的转化体系中，手性产 物的产率皆不高，文献[6]报道的面包酵母使用量偏多，转化时间又长。为了参与国际水平 的竞争，弥补国内生物法合成L-p -MeO-PAC 和p -MeO-PPDA 的研究空缺。本文对面包酵母 转化大茴香醛生成手性化合物的体系进行了研究，并借助于TLC 法、比色法和GC/MS 法， 对该两种手性化合物的合成条件进行了优化，得出了理想的合成条件。 - 1 - 图1 L-p -MeO-PAC, p -MeO-PPDA 及其它相关产物的合成途径 Figure 1 The pathway for synthesis of L-p -MeO-PAC, p -MeO-PPDA and associated products 2. 材料与方法 2.1 材料与仪器 2.1.1 试剂 大茴香醛 纯度95% , 国药集团化学试剂有限公司；硅胶GF254,青岛海洋化工有限公司； 肌酸，国药集团化学试剂有限公司；ɑ-萘酚，上海亭新化工厂。 2.1.2 菌种 面包酵母 baker’s yeast ，安琪高活性干酵母，安琪酵母股份有限公司。 2.1.3 培养液 100g/L 蔗糖，1.0g/L NH4 2SO4，1.5g/L Na2HPO4 。 2.1.4 仪器