第7章免疫电泳技术-安徽理工大学.pdfVIP

安徽理工大学医学院 S c h o o l o f M e d i c i n e 教案首页 次课 授课时间 年 月 日 教案完成时间： 年 月 日 临床免疫学和 课程名称 年 级 专业、层次 免疫检验 专业技术 授课方式 教 师 张荣波 学时 3 职 务 （大、小） 授课题目 （章、节） 第七章 免疫电泳技术 基本教材或主要参考书 王兰兰主编 《临床免疫学和免疫检验》 （ 3 版，人民卫生出版社） 教学目的和要求： 1 了解电泳技术及电泳载体的特性。 2 熟悉免疫电泳技术的基本原理，电渗作用与免疫电泳的关系，影响电泳结果的因素。 3 掌握各种免疫电泳的概念和在医学检验中的应用原则，对结果的判断和分析。 大体内容与时间安排，教学方法：课堂讲授 辅以启发式提问，配以多媒体投影 1、免疫电泳的基本原理（0.5 学时） 2 、对流免疫电泳（0.5 学时） 3、火箭免疫电泳（0.5 学时） 4 、免疫电泳（0.5 学时） 5、免疫固定电泳（0.5 学时） 6、医学检验中的应用 （0.5 学时） 教学重点、难点： 重点：免疫电泳技术的基本原理，电渗作用与免疫电泳的关系，影响电泳结果的因素。 难点：对流免疫电泳，免疫电泳 教研室审阅意见： （教研室主任签名） 年 月 日 （教案续页） 辅助手段和时间 基 本 内 容 分 配 备 注 免疫电泳技术是将电泳方法与免疫反应相结合，大大提高了蛋白质组 分分离和鉴定的检测敏感性和特异性，扩大了其临床应用的范围。 0.5 学时 第一节 免疫电泳的基本原理 1953年，Gmbar和william首次将凝胶扩散置于直流电场中进行，让电 流来加速抗原与抗体的扩徽并规定其运行方向，并与免疫沉淀反应相结合， 技术有两大优点，一是加快了沉淀反应的速度，是将某些蛋白组分利用 其带电荷的不同而将其分离开，再分别与其对应抗体反应，以此作更细微 的努析。免疫电泳技术的种类很多，这里仅将常用的技术介绍如下。 0.5 学时 第二节 对流免疫电泳 对流免疫电泳(counter immunoelectrophoresis，CIEP)的原理是将双 向免疫扩散与电泳相结合的定向加速的免疫扩散技术。在碱性缓冲液中， 蛋白质抗原带负电荷，在电场中向正极泳动，而作为抗体的IgG 其分子量 大，暴露的极性基团较少，解离也少，在电场中也缓慢向正极，但电渗引 向阴极移动的流速超过了IgG向正极的速度，这就是电渗所致的IgG呈反向 负极倒退。实验时在琼脂板上打两排孔，左侧阴极端各孔加入待测抗原，