鸭肿头败血症病毒XD株的鸭胚原代细胞培养特性及免疫电镜观察的研究.pdfVIP

中文摘要 鸭肿头败血症病毒(Duck 孤病毒科正呼肠孤病毒属，鸭肿头败血症病毒呈球形，大小约65～80nm，无囊膜， 头部肿大，全身弥漫性出血为特征。 本试验通过对鸭胚日龄，胰酶浓度和营养液小牛血清浓度的选择，经过反复试验， 牛血清的营养液成功培养鸭胚肾细胞。 通过鸭肿头败血症病毒(DSHSV)在鸭胚成纤维细胞，鸭胚肝细胞，鸭胚肾细胞 上的培养特性观察，发现鸭肿头败血症病毒在鸭胚成纤维细胞和鸭胚肾细胞上不生 交达一半以上，随着在鸭胚肝细胞上继续传代，能稳定的出现一致的细胞病变，同时 病变时间开始提前，细胞在接毒后8h开始出现细胞病变效应，几乎所有的细胞都可 见明显的细胞病变，主要表现为细胞界限变清晰，胞核肿胀，胞内颗粒增多，16h原 肿胀且颗粒增多的细胞出现明显的脱落，并且漂浮在细胞培养液中，脱落细胞约占 50％。由于周边细胞脱落，未脱落细胞占据原飘落细胞的位置，使得单个细胞体积变 大，细胞间隙增宽，按种24h后原致密的单层肝细胞因为病变细胞脱落而产生大量的 空斑，细胞脱落约75％。病毒液中悬浮大量散在的脱落细胞。 经纯化的鸭肿头败血症毒添加弗氏佐剂后，制备兔抗鸭肿头败血症病毒血清，处 理后的鸭肿头败血症肝细胞毒和该血清做免疫电镜观察，观察到大小约65～7