L-乳酸产生菌育及发酵优化.pdfVIP

L一乳酸产生菌选育及发酵优化 摘要 本论文采用紫外诱变和亚硝基胍诱变两种方法，对出发菌株米 根霉3038进行诱变筛选得到一株高产正突变菌株，优化了培养基 和培养条件，并对软质聚氨酯泡沫载体固定化米根霉菌丝体发酵生 产L．乳酸进行了研究。 在诱变育种实验部分，采用溴甲酚绿平板变色圈法筛分出变色 圈大的菌株，然后经液体试管培养，用纸层析法定性测定产乳酸情 况，弃去不产乳酸和产乳酸显著减少的菌株，将初筛所得菌株进行 摇瓶复筛。该初筛方法较准确，且简便、易操作。 将米根霉3038进行紫外诱变，筛选出产酸量最高的一株正突 变菌株，将其命名为米根霉DH．1。然后将米根霉DH．1进行亚硝 基胍诱变，筛选出产酸量最高的一株正突变菌株产酸为60．539m， 比米根霉3038产酸量提高24．36％，将它命名为米根霉DH．1．2。 培养基及培养条件优化结果为：种子培养基碳源浓度为5．oo％， 氮源浓度为O．25％，种子培养温度37℃。发酵培养基碳源浓度为 13．00％，氮源浓度为0．20％，金属离子Fe2+对发酵产酸影响较大， 本论文采用游离菌丝方式进行种子培养，然后控制发酵培养基 中的软质聚氨酯泡沫载体添加量，形成吸附固定化小菌球与游离菌 体自聚集成小球混合发酵产酸。该方法操作简便，且避免了菌丝缠 结成大的菌丝团，又发挥了固定化菌丝发酵和游离菌丝白聚集形成 小菌球体发酵的双重优点，产酸量得到提高。聚氨酯泡沫载体尺寸 大小以2mm3-3mm3为宜。按体积百分数计，载体的适宜添加量为 5．40％。发酵温度30。C，摇床转速160 rpm。 关键词：米根霉，L．乳酸，诱变，固定化，混合发酵 STRAIN SCREENINGAND FERMENTATl0N0F L．LACTICACID ABSTRACT Inthis theseeds of paperfirstlyimprovement Rhizopusoryzae 03 3 8wascarried then out，andthecutureandcultureconditionsofthe mutantwere the mixedfermentationconditionsof investigated，Finally the mutantwerestudied． theultraviolet Byusing radiation(UV)andN-methyl—N’一nitroso． the mutationand thestrain N‘nitroguanidine(NTG)as selecting toitsinherent astrain the according characters，we got overproducing lactic L—lactic acid，whose acid was production