大叶补血草活性分的研究.pdfVIP

Thesis for the Degree of Master Studies on Bioactive Components from Limonium gmelinii Supervisor: Chengyu Tan Master Candidate: Xiaohui Chi Environmental Science Dalian Ocean University Dalian, Liaoning Province, PR. China JUNE 2015 摘 要 摘 要 本论文以新疆特色盐生植物——大叶补血草（Limonium gmelinii ）为研究对象， 通过多种色谱分离纯化方法相结合，对其石油醚、乙酸乙酯和正丁醇浸膏进行了系统 分离纯化，共分离得到 10 种化合物，通过理化性质分析、光谱数据分析等，鉴定了 其中 8 种化合物，分别为杨梅素（C-1）、β-谷甾醇（C-2 ）、二氢杨梅素（C-3 ）、 没食子酸（C-4 ）、杨梅素-3-O-α-L- 鼠李糖苷（C-5 ）、槲皮素（C-6 ）、胡萝卜苷（C-7 ） 和芦丁（C-8 ），其中化合物C-3、C-6、C-7 和C-8 为首次从该植物中分离得到。 考察了闪式辅助萃取-热回流法提取制备大叶补血草总黄酮的工艺条件。热回流 提取中以50%乙醇作为溶剂，料液比为1:70，闪式辅助萃取时间15min，热回流温度 为90C 。利用大孔吸附树脂进一步纯化总黄酮，筛选到AB-8 型大孔吸附树脂对补血 草总黄酮具有较好的吸附率和解吸率,其吸附率为 62.6% ，解析率为 79.3% 。考察了 AB-8 大孔吸附树脂对总黄酮的静态吸附曲线，并对溶剂浓度和溶剂用量进行了优化。 建立了 RP-HPLC 同时测定大叶补血草中的四种黄酮醇类化合物—— 杨梅素 -3-O-α-L- 鼠李糖苷、杨梅素、芦丁和槲皮素的方法。采用色谱柱Kromasil C18 柱， 甲醇-水-磷酸（40:60:0.4 ）作为流动相，265nm 下进行检测，结果表明，该方法在检 测条件下对四种化合物的分离具有精密度好、重现性高、稳定性好、平均加样回收率 高等优点，可用于大叶补血草中四种黄酮醇的含量分析。 对大叶补血草的提取物及总黄酮进行了体外清除自由基、抑制ACE 活性以及对 急性酒精性肝损伤活性肝脏保护作用实验。结果表明，大叶补血草总黄酮在浓度分别 为 50，100，200μg/mL 时对DPPH具有一定的清除活性，其活性大小与浓度成剂量 依赖关系，对OH的清除活性不强。乙醇提取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和 水层萃取物在浓度为 100mg/mL 时具有相对较高的抑制ACE 活性。对制备的总黄酮 进行了急性酒精性肝损伤模型小鼠的肝脏影响实验，结果表明，总黄酮具有降低肝脏 指数，降低肝组织中ALT 、AST 活力，提升 SOD 活力，减少 MDA 、LDH 、TC 和 TG 的含量，从而起到肝脏保护作用。其作用机制可能与总黄酮的抗氧化活性有关。 关键词：大叶补血草；化学成分；含量分析；总黄酮工艺；活性研究 I Abstract Abstract In this paper, ten chemical constitutes were isolated by various chromatographic and recrystallized methods from Limonium gmelinii in Xinj iang. On the basic of analysis of NMR data and measurement of physico-chemical characters, the structures of 8 compo