杜仲中京尼平苷和松酯醇二葡萄糖苷的分离及多种成分同时检测方法.pdfVIP

杜仲中京尼平苷和松酯醇二葡萄糖苷的分离及多种成分同时检测方法.pdf

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杜仲中京尼平苷和松酯醇二葡萄糖苷的分离及多种成分同时检测方法.pdf

摘要 ulmodie 本论文以杜仲(Eucommiaoliver)中降血压活性成分京尼平苷酸 (Geniposidic Diglucoside,PDG,下同)为研究对象,研究了其提取、分离及纯化方法及工 艺,并对杜仲中多种活性成分的同时检测方法进行了研究。具体研究结果如下: 1.确定了提取、分离及纯化杜仲叶提取物中GPA的优化方法及工艺。 (1)获得了杜仲叶提取物中GPA的优化提取方法及工艺。 采用超声辅助溶剂提取法。以60%乙醇一水溶液(V/V)为提取溶剂,提取 温度60℃、提取2次、提取时间60min/次。在上述优化工艺下,GPA提取率达 93.42%。 (2)获得了杜仲叶提取物中GPA的优化分离、纯化方法及工艺。 采用大孔吸附树脂柱层析方法。 通过常温下的静态吸附、脱附实验,优选出S.8型大孔吸附树脂作为分离、 纯化GPA的首选树脂。 通过动态吸附、脱附实验,优化出洗脱S.8型大孔吸附树脂中GPA的工艺 1.0, 为:用水作为洗脱剂,脱附剂用量300mL、脱附剂流速3mL/min、上柱液pH 脱附剂流速对脱附过程的影响最大、上柱液pH值影响最小。在上述优化工艺下, GPA的平均脱附率达89.“%。 2.确定了联合提取、分离及纯化杜仲生皮中GPA和PDG的优化方法及工 艺。 (1)获得了联合提取杜仲生皮中GPA和PDG的优化方法及工艺。 采用加酶微波辅助溶剂提取法。用水作为提取溶剂,按照l:15(g/mL)、1:1 (g/mL)加入蒸馏水、O.5%纤维素酶溶液,提取温度60℃,微波辐射2次、每 次30 (2)获得了联合分离、纯化杜仲生皮提取物中GPA和PDG的“聚酰胺柱层 析预处理--S一8型大孔吸附树脂吸附一水洗脱GPA—-40.50%(VⅣ)乙醇一水溶 液洗脱PDG”的优化组合方法及工艺。 采用大孔吸附树脂柱层析方法。 通过常温下的静态吸附、脱附实验,优选出S.8型大孔吸附树脂作为联合分 离、纯化GPA和PDG的首选树脂。 通过动态吸附、脱附实验,优化出洗脱S.8型大孔吸附树脂中GPA、PDG mL,流速3mL/mim再用40-50%的 的工艺为:先用水洗脱GPA,水用量300 mL,流速5mL/min。在上述 乙醇.水溶液(V/V)洗脱PDG,洗脱剂用量250 优化工艺下,GPA和PDG的平均洗脱率分别达88.56%%和89.34%。 洗脱液经浓缩、冷冻干燥后,所得粉状纯化产物中GPA、PDG的纯度分别 的含量,分离、纯化效果显著。 3.建立了两个能同时测定杜仲提取物中四种活性成分含量的高效液相色谱 (HPLC)方法。 (1)建立了同时测定杜仲中京尼平苷酸(GPA)、绿原酸(CA)、京尼平苷 (GP)和芦丁(Rutin)含量的定波长一梯度洗脱模式HPLC检测方法。 II nm,进样5L,流动 反相色谱柱(250mm4.6mm,5ttm),柱温37℃,波长254 mL/min,梯度洗脱 相:A相为甲醇、B相为0.1%磷酸.水溶液(2:98),流速0.8 min-30.00 程序:0.01 min:70—30(B相在整个流动相中的百分比,下同),30.00 min一30.01min:30—’70,30.01mini--40.00min:70。 在上述色谱条件下,四种成分分离良好,GPA、CA、GP和Rutin进样量的 ll p p ll 线性关系范围分别为0.3~2.4 g、O.2乒1.28g、0.05-1

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