动态超高压微射对甘薯叶黄酮提取、结构以及抗氧化性的影响.pdf

摘要 摘要 我国四大粮食作物之一，其叶作为蔬菜具有丰富的营养价值，享有“蔬菜皇后 的美誉。研究表明，甘薯叶中黄酮化合物含量高于一般蔬菜，具有抗氧化、抗 肿瘤抑菌等生理功效，但是甘薯收获后的甘薯叶并没有引起人们的重视，而是 作为农业垃圾而丢弃。本论文以秋季甘薯收获后的甘薯叶为原料，利用动态超 高压微射流技术处理提取甘薯叶中黄酮类化合物，研究该处理技术对甘薯叶黄 酮得率、结构和抗氧化性的影响。 主要研究内容和结果如下： l、以芦丁为对照，采用硝酸铝显色法测定甘薯叶中黄酮含量。结果表明， nlil和504 经显色反应后，芦丁和甘薯叶黄酮最大吸收波长基本一致，分别在505 nm，芦丁标准曲线回归方程线性良好，并且精密度较高，能够用于甘薯叶黄酮 含量的测定。 2、比较了甘薯叶、叶柄、藤的黄酮含量，结果表明，甘薯叶中黄酮含量最 高，并确定其为最佳试验原料进行后续试验。 3、通过正交试验优化了动态超高压微射流处理提取甘薯叶黄酮的最佳提取 工艺，结果表明，提取温度是影响甘薯叶黄酮提取的最主要因素，确定最佳工 MPa、 艺参数为：乙醇体积分数70％、料液比l：40(g／mL)，微射流处理压力为100 提取温度75。C、提取时间120min、微射流处理次数2次、样品提取3次。最佳 条件下得率为5．75％。 4、分别采用扫描电镜放大300倍和5000倍观察甘薯叶样品的微观结构， 结果表明：经动态超高压微射流处理的甘薯叶颗粒的粒度小于均质机处理的甘 薯叶颗粒的粒度；随着微射流处理压力的增加，甘薯叶颗粒的粒度降低，在120 MPa时效果最佳，在140MPa下甘薯叶颗粒会产生凝聚作用，凝结为较大的颗 粒；微射流处理对细胞破碎程度随着压力的增加而增加。 静态吸附．解析试验，并筛选出5种树脂进行静态吸附动力学试验，确定性能最 佳的树脂为LK001树脂，最佳上样浓度在2～3 mg／mL之间，并通过动态吸附解 摘要 析试验确定最佳工艺参数为：上样流速为2mL／min，洗脱剂为70％(V／V)乙 醇，洗脱流速为1．5mL／min。 6、利用HPLC—MS／MS对提取得到的甘薯叶黄酮进行结构分析和槲皮素含 量测定，研究动态超高压微射流处理对甘薯叶黄酮结构和槲皮素含量的影响。 结果表明，甘薯叶中含有槲皮素、杨梅黄酮、槲皮素．3．O．葡萄糖苷、鼠李柠檬 素、商陆黄素、紫云英苷、4’，7．二甲氧基山奈酚7种黄酮类化合物，还含有绿原 酸及其衍生物；微射流处理对甘薯叶黄酮结构没有显著影响，微射流处理提取 的甘薯叶黄酮，槲皮素含量降低，鼠李柠檬素含量增加；建立了槲皮素的 HPLC．MS／MS的定量分析方法，测定甘薯叶常规提取样品中槲皮素含量百分比 为1．798％，甘薯叶经微射流处理提取样品中槲皮素含量百分比为1．425％。 7、通过对常规提取、常规提取液100MPa微射流处理、微射流100MPa处 理提取的甘薯叶黄酮样品粗提液和纯化样品进行清除DPPH自由基、超氧阴离 子自由基、羟基自由基试验，研究微射流处理对甘薯叶黄酮抗氧化性的影响。 结果表明，不同方法处理的提取液均具有清除3种自由基的效果，并且随着甘 薯叶黄酮浓度增加清除自由基能力增强，但清除效果弱于Vc，对自由基的清除 能力依次为清除DPPH自由基能力清除02-能力清除·OH能力。纯化的样品清 除自由基效果优于提取粗液；3种不同处理方法未纯化样品的清除自由基的能力 没有明显区别，微射流100MPa处理提取纯化后样品清除能力优于常规提取以 及常规提取液100MPa微射流处理样品。 关键词：甘薯叶黄酮；动态超高压微射流；大孔吸附树脂；槲皮素；抗氧化性 III Abstract ABSTRACT Sweet batatas