工业酿酒酵母F株aldlt;,6gt;基因敲除的研究.pdfVIP

摘要 乙酸作为挥发酸的重要组成部分，含量过多是造成啤酒偏酸的主要因素。酿酒酵母 染色体上ald6基因编码的乙醛脱氢酶是控制乙酸发酵的关键酶，乙醛脱氢酶的活性高时 乙酸产生的量多。本论文采用敲除酿酒酵母染色体上部分或全部ald6基因的方法得到 ald。基因缺陷型改良菌株。改良后的酿酒酵母在酿造啤酒时能够有效的控制乙酸的产 量。 酵母ald。基因同源序列的具有G418抗性的外源基因片段。利用完整细胞转化法将构建 的外源基因片段导入工业酿酒酵母F细胞内，外源基因片段通过同源重组而整合于酿酒 酵母染色体，破坏酿酒酵母ald。基因从而得到ald。基因敲除菌株。 通过发酵试验，比较alde基因敲除菌株cl和原始酿酒酵母F的生长性状、发酵性 能及啤酒中乙醛、双乙酰、高级醇及乙酸等成份的含量，发现al也基因敲除菌株对于发 酵液中的双乙酰还原能力比原始菌株强，乙醛脱氢酶产量比原始菌株少，发酵液中乙酸 含量比原始菌株少，ald。基因敲除菌株的发酵速度、发酵度比原始菌株低，经过发酵驯 化试验提高了ald。基因敲除菌株的发酵速度。通过100L啤酒发酵罐发酵啤酒试验，ald。 基因敲除菌株酿造的啤酒的乙酸含量比原始菌株酿造的啤酒中乙酸含量低，啤酒口感更 好。 关键词：酿酒酵母，乙醛脱氢酶，基因敲除