四株克雷伯氏菌K抗原基因簇的破译及其多重PCR检测方法的建立.pdf

摘要 摘 要 克雷伯氏菌是自然界中常见的条件致病菌，并且近年来其中的肺炎克雷伯 氏菌成为了仅次于大肠杆菌的条件致病菌，主要存在于人以及动物肠道中、呼 吸道中及泌尿生殖道中。肺炎克雷伯氏菌可在全身所有的部位发生感染现象， 可是发病率最高的地方还是在尿路和呼吸道中。 对于克雷伯氏菌中K一抗原基因簇的研究，非常有利于解析克雷伯氏菌的K一 抗原多样性的形成机制。K一抗原特异基因均存在于K一抗原基因簇中，基于特异 基因的特异分子标识的筛选，为克雷伯氏菌分子分型系统的建立奠定基础。 在本实验中，鉴定了克雷伯氏菌K3、K50、K54、K57四种抗原的K一抗原基因 簇。确立了一种基于K一抗原基因簇特异基因的，检测6种血清型克雷伯氏菌的 多重PCR检测方法。我们用77种克雷伯氏菌标准菌株，144株临床菌株和其他种 属的6株菌证明了这种方法是有很高的特异性和可重复性的。通过灵敏性的相 关试验表明，这种检测方法最低可以检测出基因组DNA至2．5ng。因此，这种检 测治病菌株的多重PCR方法，可以用于相关克雷伯氏菌临床或者环境样品的检 测，并且这种方法在流行病学调查中具有非常重要的作用。 关键词：克雷伯氏菌，荚膜多糖，K一抗原