犬α7干扰素在大肠杆菌和毕赤酵母中的活性表达及分析.pdf

摘要 捅 要 干扰素(Interferon，IFN)是由特定细胞产生的一类具有调节机体免疫功能、抗病毒、 抗肿瘤等多种生物活性的分泌型糖蛋白，是机体防御系统的重要组成部分。近年来，由于干 扰素具有无药物残留，无毒副作用的特点，使其在防治畜禽疫病特别是病毒性疫病方面越来 越受到关注。但是犬干扰素一位(CaIFN．0【)的研究和应用相对落后。 1．为了在大肠杆菌表达系统中高效表达具有抗病毒活性的犬a干扰素，在犬肝脏组织 DnaB 端无缝连接内含肽Ssp 内含肽和麦芽糖结合蛋白基因的重组表达载体。重组载体在大肠杆菌感受态Rosetta中经 IPTG诱导高效表达可溶性CalFN．Q蛋白，经直链淀粉树脂纯化后可得到纯度较高的目的蛋 2．为了使表达的犬11干扰素具有无冗余氨基酸的N端，本研究将犬0【干扰素基因连接 l 15中，对培养基上 入pPICZllA载体的分泌信号肽序列后，用LiCl转化法转化入酵母菌Gs 清进行简单处理进行SDS—PAGE分析，表达的蛋白约25ku。分析原因，是由于