Vgb基因转化衣草愈伤组织及转化体耐涝性研究.pdfVIP

ggb基因转化薰衣草愈伤组织及转化体耐涝性研究 摘要 本研究以薰衣草叶片为外植体建立了英国薰衣草愈伤再生体系，并以愈伤组织为受 体，通过农杆菌介导法进行了Vgb(透明颤菌血红蛋白基因)的遗传转化，获得再生植 株。对转Vgb基因的薰衣草耐涝性进行了鉴定。本研究取得的主要结果如下： 0．10 O．30 1．以MS+2，4一D mg／L+KTmg／L为诱导愈伤组织最佳培养基；将淡黄色愈伤 2．0 组织放在MS+6一BA 0．50 d后形成大量 mg／L+NAAmg／L培养基上继代培养2～3次，30 1．0 的丛生芽。待小芽长至1~2cm后放入MS+6．BA mg／L扩繁培养基中扩繁1~2代。扩繁 后的小芽放入1／2MS+IAA1．0 d后生根率达93．33％，得 mg／L培养基上进行生根培养，20 到完整再生植株。 2．农杆菌介导薰衣草愈伤组织，获得转Vgb基因的转基因植株。转化条件为：愈 h。 伤组织无需经过预处理，直接在OD值为0．4～0．8的菌液中浸泡15min后暗培养24 处理完毕后，将愈伤组织转入添加30 Karl及300 mg／L mg／L头孢霉素的培养基中诱导转 基因愈伤分化，获得正常再生植株。通过PCR检测初步筛选转基因植株，将阳性植株 移栽，成活率达到100％以上。 3．对转基因薰衣草和非转基因薰衣草进行过氧化物酶、叶绿素含量、脯氨酸含量、 可溶性糖、可溶性蛋白生理生化指标的比较。结果表明：转基因薰衣草在过氧化物酶、 叶绿素含量、脯氨酸含量、可溶性糖、可溶性蛋白含量均高于非转基因薰衣草。 4．水淹处理试验间接表明耐涝基因得到了表达。 关键词：薰衣草；再生体系；透明颤菌血红蛋白基因；遗传转化；耐涝性 ofLavandula and the GenetoCallus Transform Angustifolia Vgb Transformation onthe of Body Study Waterlogged Abstract wastoestablish somatic and Themain ofthis high—level embryogenesisplant objective study transform andobtain ofthe mm咖ciens瞻6gene lavender,thenAgrobacterium regenerationEnglish Weusedto