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具有群体感应抑活性的海洋细菌的筛选与活性物质研究
度、转速、接种量、pH和培养基组成对菌株生长、代谢物产量、群体感应抑制活性的影响。
结果表明:108号菌株最佳发酵条件为发酵时间36h,发酵温度25℃,转速120
rpm,接
7;最佳培养基组成为蛋白胨15 15
种量5%,培养基pH g/L,酵母膏5g/L,NaClg/L。
(4)采用优化的培养条件对菌株108进行规模化培养,培养体积为45L,经乙酸乙
酯.丙酮萃取后,得到粗提物2.9g。将108的发酵产物初步分成极性不同的三相:正己烷
相、二氯甲烷相和甲醇水相,运用滤纸片法进行活性测试。结果显示,活性组分主要集中
于二氯甲烷相中。采用薄层层析法选择分离108号菌活性产物的溶剂体系、溶剂比例及代
谢物质大致的极性段。结果表明,丙酮和石油醚体系适于108二氯甲烷相的分离。用反相
的梯度洗脱,对洗脱下的物质进行活性追踪,发现60%甲醇水洗脱下的物质具有最强的群
体感应抑制活性,在250 nllil。
rtg/片的用量下,活性物质对紫色杆菌素的抑制圈半径达到7
高效液相色谱面积归一化法结果显示,活性产物含量为15.962%。核磁共振波谱(混合氢
谱)和GC.MS质谱初步分析结果,活性成分主要为环(脯氨酸一亮氨酸)。
关键词:紫色杆菌;群体感应抑制活性;分离筛选;活性物质;鉴定
forthe from
Screen sensinginhibitoryactivity
quorum
marinebacterialisolatesandthe ofactive
study
Abstract
The ofbacterialresistanceis serious bacteria
problem drug becomingdaybyday.Somepathogenic
the
arefound resistanttothetraditionalantimierobial removebacterial
fundamentally
easily drugs.To
the or
is toblockthe of
important expressiondisease-causinggenesbyblockingchange
pathogenicity,it
the the willnot eliminatethebacterial
integrantpathwayduringpathogenicprocess.Thisonly
alsoavoidthe resistance
pathogenicity,butdrug problem.Quorumsensingregulatesmanyphysiological
bacterial isalsoaffectedthebacterial
functionsof them
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