用彗星试验检测基酚对海洋生物血淋巴细胞的DNA损伤.pdfVIP

摘 要 Gel Cell 彗星试验(Cometassay)义称单细胞凝胶电泳试验(Single 于其具备快速、灵敏、需样品量少等优越性，应用前景十分广泛。为了在本实验 室建立彗星试验方法，利用该方法检测烷基酚类化合物对海洋生物血淋巴细胞的 DNA损伤，并且扩展该方法在海洋生态风险评价中的应用，进行了本项实验。 A，BPA)等酚类化合物对海洋贝类血 酚(octylphenol，OP)和双酚A(bisphenol 试验进行24h和48h后，分别采集血淋巴细胞进行单细胞凝胶电泳试验。 本研究包括以下几部分：首先采用壬基酚对海湾扇贝(Argopecten gigas)、 meretrixLinnaeus)进行了体内染毒实验，通过对三种贝类染 文蛤(Moretriz 毒后血淋巴细胞的彗星试验结果进行了遗传毒性分析。结果表明：不论活体还是 离体试验，从血淋巴细胞的彗星图和试验数据分析结果可以看出，随着壬基酚溶 液浓度的增大，彗星尾长和细胞迁移率均相应增加，说明壬基酚溶液剂量越大， 对贝类血淋巴细胞DNA的损伤越严重，且壬基酚浓度与贝类血淋巴细胞DNA损 伤程度之间存在着明显的剂量一效应关系。结果还表明NP对贝类的遗传毒性风 险浓度为0．025mg／L，高于此浓度将会对贝类的DNA结构稳定性造成不同程度的 破坏而致突变、致畸变和致癌变，同时由于人类的食物摄取可能会影响到人类的 健康。数据分析结果同时表明，在相同浓度的王基酚处理组中，扇贝、牡蛎和文 晗血淋巴细胞的破坏率和迁移跃度存在种间差异，这可能是由于这三种贝类对 iP的免疫程度不同所致，但关于海洋生物对外界干扰因素存在不同免疫力的具 瘁机制以及它们之间的差别，目前国内外的研究还不多见，具体研究还有待进一 步的开展。 本文第二部分研究了不同的酚类化合物(丁基酚、辛基酚和双酚A)对海 湾扇贝血淋巴细胞DNA的损伤状况，彗星试验结果表明：随着丁基酚、辛基酚和 双酚A溶液浓度的增高，彗星尾长和迁移率明显增加，说明丁基酚、辛基酚和双 酚A的剂量越大，对贝类血淋巴细胞DNA的损伤越严重，且染毒浓度与贝类血 淋巴细胞DNA损伤之间存在着明显的剂量一效应关系。四种酚类化合物染毒 24h和48h后，对扇贝血淋巴细胞DNA迁移长度的影响能力均呈现如下规律：NP (BPA(BPoP，表明在相同条件下，壬基酚的遗传毒性最小，其次是双酚A， 再次是丁基酚，遗传毒性最大的是辛基酚。关于不同酚类化合物之间遗传毒性大 小的比较研究国内外开展甚少，作者从本项研究结果进行了初步推论，以期为今 后该方向的研究工作提供一定的参考依据。 ． 本文最后对青岛胶州湾海域海洋生物的遗传毒性损伤进行了环境风险评 价，我们根据污染程度选取了有代表性的两个养殖场：红岛养殖场(重污染区) 和沙子口养殖场(轻污染区)，分别采集两个养殖场中的海湾扇贝，进行彗星试 验分析，对扇贝的DNA损伤进行了检测，结果发现沙子口养殖场的扇贝血淋巴细 胞没有出现DNA迁移，因此基本确定沙子口养殖场的污染程度较轻，DNA破坏率为 零。而红岛养殖场的扇贝，其血淋巴细胞中有17％发生了DNA迁移，平均迁移长度 为2．984“m。同时对这两个养殖场海水中的壬基酚浓度进行了化学分析，发现红 分析结果与彗星试验结果吻合，表明红岛养殖场的污染程度大于沙子口。该项研 一 7 究表明胶州湾海域已经受到遗传毒性污染物的影响，应给予进一步的关注。 关键词：彗星试验烷基酚遗传毒性DNA损伤贝类