过氧化物酶显示和观察.pptVIP

细胞中过氧化物酶的显示与观察 peroxisome ◆Peroxisomes are simple, membrane-bound vesicles (or microbodies, as they are also called) ◆A diameter of 0.1 to 1.0 μm that often contain a dense, crystalline core of oxidative enzymes ◆Peroxisomes are multifunctional organelles, containing more than 50 enzymes involved in such diverse activities ◆glyoxysome乙醛酸循环体: specialized type of peroxisome, present in plants. 过氧化物酶体包括2种酶类： ◆氧化酶(oxidases) ●约占过氧化物酶体酶总量的一半 ●各种氧化酶作用于不同的底物 ●将氧还原成过氧化氢。 RH2 + O2 → R + H2O2 ◆过氧化氢酶(catalase) ●是过氧化物酶体的标志酶 ●约占过氧化物酶体酶总量的40% ●作用是将过氧化氢还原成水 RH2 +H2O2 → R + 2H2O 实验原理 氧化还原酶类的原位显示：根据氧化还原的原理，使无色的化合物氧化成有色的物质得以定位。 过氧化物酶体系能把许多胺类氧化成有色化合物。本实验用联苯胺混合液处理标本，过氧化物酶可将其氧化为蓝色或棕色产物。 根据颜色反应，可判定过氧化物酶的有无或多少。 实验步骤 实验一： 取洋葱鳞片表皮一薄片； 置于0.85％NaCl溶液中3－5分钟。培养皿1 浸在溶有0.1%钼酸胺的0.85％NaCl溶液中5分钟。培养皿2 在使用联苯胺溶液前，每2ml加10%的过氧化氢2滴。培养皿3 浸在联苯胺溶液中2分钟，至切片出现蓝色为止。培养皿3 在0.85%NaCl溶液中洗1min。培养皿4 将薄片置于载玻片上展开，盖上盖玻片，显微镜检查。 实验结果 1、在显微镜下可见到细胞中有一些染成蓝色或棕色的颗粒。即为过氧化物酶存在的部位。 作业 绘图表示出细胞内过氧化物酶的分布。 细胞中过氧化物酶的存在有何功能？ * * ( peroxisome) 微体（micro-bodies） 电镜下的过氧化物酶体 电子致密的核心是尿酸氧化酶的结晶，即类核体 过氧化物酶体的增殖 RH2+ O2 R + H2O2 H2O2 + R’H2 R’ + H2O 实验二： 取马铃薯块茎一个，用徒手切片法切取一小薄片置于载玻片上， 滴加3％的过氧化氢溶液。 用煮熟的马铃薯重复上述过程，结果如何？ 2、 滴加了过氧化氢溶液的马铃薯组织四周出现气泡，提示植物中过氧化氢酶的存在。 过氧化氢酶能使H2O2分解，生成H2O和O2 H2O2 H2O + O2 RH2 +H2O2 → R + 2H2O * *