实验一培养基的配制和灭菌创新.pptVIP

1 、牛肉膏蛋白胨培养基配方（见实验课本214页） 2 、葡萄糖发酵培养基配方（见实验课本217页） 3 、乳糖发酵培养基配方（见实验课本217页） 4、 明胶培养基配方（见实验课本217页） 5 、淀粉培养基配方（见实验课本217页） 四、实验内容 （一）、培养基的配制： 同学们先将试管贴好标签。注明培养基名称，日期。标签粘贴位置在离管口1/3管身处。 注意：标签用铅笔书写，以防高温灭菌时蒸汽模糊字迹 操作图示： 四、实验内容 高压蒸汽灭菌法其步骤如下： 1. 灭菌器内加入一定量的水，将包扎好的物品放入其中。2. 接通电源，进行加热3. 排除高压锅内的冷空气，可将排气阀打开，待排出大气后关闭排气阀；或关闭排气阀，待压力上升到0.5kg/cm2时再打开排气阀，待压力回复到0时再关闭排气阀。4. 当压力达1.05kg/cm2时，此时灭菌器内的温度为121℃，维持30min。对热不稳定的培养基如含有葡萄糖、氨基酸等物时，应适当降低压力，延长时间。5. 灭菌时间一到，切断电源，待压力降至零时，才能打开排气阀，然后打开灭菌器盖，取出物品 实 验大分子物质的水解实验及糖发酵实验 一、实验目的 1. 证明不同的微生物对各种有机大分子的水解能力的不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统。 2. 掌握进行微生物大分子水解实验的原理和方法 3. 了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用 4. 掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法 二、实验原理 微生物代谢与其他生物代谢有着许多相似之处，也有不同之处。微生物代谢重要特征之一，就是代谢类型的多样性，因此使得微生物在自然界的物质循环中起着重要的作用，同时也为人类开发利用微生物资源提供更多的机会与途径。人们在微生物的分类鉴定工作中，常利用其生理生化反应作用作为重要依据。 本实验分别安排微生物对生物大分子的分解利用（淀粉水解实验水解试验、明胶液化试验），对含碳化合物的分解利用（糖发酵试验）让同学们对微生物的代谢类型多样性有一个初步和感性的了解，同时学习利用微生物形态、结构以及生化反应的特征对某些细菌进行初步的分类。 本实验学习平板接种法、穿刺接种法、液体接种法。 四、实验内容 五、实验报告 （2）糖发酵实验结果 将结果填入下表。“＋” 表示产酸或产气，“－”表示不产酸或不产气。 * * 实 验 培养基的制备和灭菌 一、目的要求 了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。 了解几种灭菌方法，重点掌握高压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。 二、基本原理 培养基是按照微生物生长繁殖所需要的各种营养物质，用人工方法配制而成的营养基质。其中含有碳源、氮源、无机盐、生长因子以及水分等。微生物在培养基上生长繁殖还必须在最适酸碱度范围内才能表现它们最大生命力，因此不同种类的微生物应将培养基调到一定pH值范围。培养基种类很多，不同的微生物所需培养基不同。按其组成可分合成培养基和天然培养基。按其物理状态可分固体培养基，液体培养基和半固体培养基。按其特殊用途可分加富培养基，选择培养基、鉴别培养基。 培养基配制后还必须进行灭菌。灭菌和消毒是二个不同含义的名词。消毒是指消灭病原菌或有害微生物，而灭菌则是杀死或消灭一定环境中的所有微生物。 消毒与灭菌的方法很多，但总的可分为物理法与化学法两大类。物理法包括加热灭菌（干热灭菌与湿热灭菌），过滤灭菌、紫外线灭菌等。化学方法主要是利用有机或无机的化学药品对实验室用具和其它物体表面进行灭菌与消毒。 三、实验分组与任务 整个班分10个组，一排为一组，每组六人 第1-2组：配制200ml牛肉膏蛋白胨培养基,分装成15支试管，每支试管装液量为试管高度的四分之一 第3-4组：配制200ml葡萄糖发酵培养基，分装成15支试管，每支试管装液量为试管高度的四分之一 第5-6组： 配制200ml乳糖发酵培养基，分装成15支试管，每支试管装液量为试管高度的四分之一 第7-8组： 配制150ml明胶培养基，分装成15支试管，每支试管装液量为试管高度的四分之一 第9-10组：配制300ml淀粉培养基。用两个三角瓶装好 四、各培养基的配方 3．注意事项： 在配制培养基时一定要注意调溶液的pH。 称药品时严防药品混杂，一把药匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净，擦干，再取另一种药品。瓶盖也不要盖错。 在烧杯融化琼脂的过程中，人要在电炉旁看着，以免培养基因沸腾而溢出烧杯。同时，需不断搅拌，以防琼脂糊底烧焦。注意带上棉纱手套防止烫伤。 分装过程中，注意不要使培养基沾在管口上，以免沾污棉塞而引起污染。 四、实验内容 （二）培养基灭菌 培养基分装好后，塞上棉塞，外面再包一牛皮纸，便可灭菌。灭菌的时间和温度按各