农杆菌介导法转玉米的研究.pdfVIP

56《729 农杆菌介导法转化玉米的研究 硕士生：王云翠 导师：邓德祥 摘 要 胚的再生影响因素作了研究，建立了J70、B73的高效再生系统，井借助自交系B73及其 GIls基因瞬时表达率建立了适合载体的遗传转化体系，且用以上建立的体系获得了转 GMCsF基因植株。试验结果如下： 1、在所用的培养条件下，基因型是影响玉米幼胚再生的主要因素，激素浓度配比、 胚性愈伤形成至q移至分化培养基中的天数、幼胚发育状态等对玉米幼胚高效再生也有很大 的影响，含N6盐的培养基和含Ms盐的培养基分别用于诱导、分化再生优于单一使用，2、 4-D、Dc、AgN晚浓度分另Ⅱ为I．Orn9，L配合使用优于单独使用或其它浓度配比，腿陉愈伤 形成后6-8天应移至分化培养基，少量的ABA(O．03Ⅱ堰儿)可以提高正常植株百分率，整 个再生过程只需40天左右的时间。 2、用自交系B73建立遗传转化体系，发现浸染时间以9分钟为宜，共培养3天，筛 选之前，在不含选择压的诱导培养基上，维持培养4-5天，有剩于转化后细胞的恢复。另 外，1．o．1．5mm长度的幼胚对农杆菌转化呈感受态，且转化后能再生、浸染培养基、渗透 压、葡萄糖等对转化也有影响。 外源基因已整合到玉米基因组中。 茭j囊词：玉米幼胚，再生，遗传转化，农杆菌介导，QM．csF基因 onMaizetransfo珊ation Study by伽6口cll!一量删 tⅢ住皇细cieHs W柚g PostgraduIlte：Yhncni Di咖r： Pm￡D旺i蛐gDeng Abstract：Int11is ofmaizeimmanlre anicle，缸tors infIIlencingreg∞emtion ofiIlbreds J7—3，B73，B77蛐d 咖bryos hybrids of havebeenstudied．An inbre出J7—3andB73werc higll system e伍cient化genccation maize咖sf0册ationmediated devel叩ed．AJs0，facto巧aff和ting byAgrobactcfi哪 tume缸ie璐haveb∞nex瓤lhled GUS臼锄sient thfough cxpfession．GM—CSFgcne wcre ab“ned the 廿anSpI跚tS usingdeveloped system． regenefadon柚d昀nsfb咖aljon Main托sults缸eaS folloV“ng： 1．h mainf她tor uSed is血e detemining c山tuI℃conditiolls，ge