利用细胞融合选优良豆乳发酵菌株.pdf

t。《％勺吐 利用细胞融合选育优良豆乳发酵菌株 摘要 本论文在已完成项目“大豆发酵饮料的研究”的基础上，为提高、改善 发酵豆乳饮料的产品质量，应用诱变育种及原生质体融合育种，筛选优良豆 乳发酵菌株。诱变育种采用紫外线两次诱变法，原生质体融合育种则采用两 组融合，即一。组为两亲本菌株均为营养缺陷型的融合；另一组为单亲灭活原 生质体的融合，经反复筛选及应用豆乳发酵实验中检验，最终获得两株发酵 性能较优的融合子F8，F15。 首先进行单倍体分离，筛选所得单倍体菌株，通过酵母菌一些常用的生 理生化实验选出发酵性能较优的菌株。 用紫外线两次诱变，诱变时间为60s，通过产酸量、变色圈直径、双乙酰 含量、发酵力等指标进行反复筛选，最终得到产酸量大于2．50mg／ml、变色吲 硫化氢及吲哚的菌株共10株。对该10株菌进行营养缺陷型标记，得到两株 氨基酸营养缺陷型菌株，即Y01—5(Lys)和Y10一13(Glu)。 融合。融合采用正交试验设计，得到的原生质体最佳制备与再生条件为：酶 后经形态特征、产孢能力、遗传稳定性、安全性、生理生化特性等指标的检 验，最终获得两株融合子F8，F15。 用b(3。)正交试验设计，以样品感观得分与总酸度为试验考察指标，得到的显 乳发酵的最佳实验条件为：加糖量9％、接种量5％、发酵温度34。C。对最终 的发酵豆乳产品进行感观、营养成份、卫生等指标的检测。结果表明，F8与 F15的确获得了比两亲本菌株更加优良的发酵特性，可作为豆乳发酵的发酵菌 株。 关键词：酿酒酵母，卡尔斯伯酵母，诱变，原生质体融合，豆乳发酵 BREEDINGELITE STRAINS FoR SoYBEAN FERMENTATIONBYPRoToPLAST FUSIoN ABSTRACT basisofthe of has Onthe fermented project，“study soybeanbeverage”whichcompleted．in the strainsfor to offerrnented screenelite order quality soVbearl improve beverage，we fermented mutation and fusion mutation soybean breedingprotoplastbreeding．The beverageby fusion the istWO twiceulffaviolet the two fusion，one adopts mutation，and adopts group breeding protoplast filtra