纳米磁性载体的备及其在生物医学检测中的应用研究.pdf

摘要 中文摘要 论文题目： 纳米磁性载体的制备及其在生物医学枪测中的应用研究 博士研究生：郭效瑛 导师姓名： 陆祖宏教授 学校名称： 东南大学 磁性纳米材料不仅具有纳米材料优越的表面性质，还对磁场有感应，这使得它们在化学、物理、 生物医学、电子材料以及传感器等诸多方面的应用越来越受到人们的关注。本论文主要研究化学发 光磁酶免疫分析法，也就是通过将磁性分离技术、化学发光检测技术与免疫学方法t者相结合，实 现对生物医学中的致病菌、疾病标志物等进行定量检测。化学发光磁酶免疫分析法具有纳米磁性载 体的超顺磁性和高比表面积，化学发光法的灵敏度高、线性范围广、测定速度快，以及免疫法的特 异性、准确性好等优点。本论文研究了由纳米磁性材料构建的多种磁性载体的制备技术，建立了新 的化学发光磁酶免疫法检测的方法，实现了肿瘤标志物、致病细菌和DNA结合蛋白的检测。研究表 明，该检测方法设计操作简单、灵敏度商、成本低、检测速度快，能够满足临床实践中多种复杂生 物医学过程和病理指标榆测的要求。本论文的主要贡献如下： (1)磁性纳米材料及磁性载体的制备 本研究成功地制备出纳米核壳式载体Co@Si02球形单核复合磁性纳米材料和Fe，04单磁畴纳米 材料，分析了纳米Fe304化学合成和形成稳定胶体的机理；发展了基于Fe304纳米颗粒的有机磁性载 体的制备技术：以非离子油酸为表面活性剂，合成出磁性Fe304凝胶，该胶体能够溶解在非极性溶 剂巾，形成稳定的超顺磁性Fe，04溶胶。将这种超顺磁磁性溶胶分散在有机聚合物嗨体中，用改进 的乳液聚合法制备出微米级的超顺磁聚合物磁珠。这种磁性载体颗粒在有机框架中固定了众多的磁 性纳米颗粒而保证了足够的磁迁移能力，有机表面可通过表面修饰带上各种官能团，易丁与生物物 质相容，携带各种生物成分，从而可实现有效的生物分离。这些聚合物可以保护内部的纳米氧化物 磁核不受外界环境因素的影响，可在多种介质条件下使用。 (2)血清中肿瘤标志物Free hCG[I的化学发光磁酶免疫法检测研究 肿瘤标志物作为诊断肿瘤的1种重要手段在临床巾越来越受到重视，在肿瘤标志物Free hCG[3 的检测上，临床上用来检测血清中Free hCGIB的含量的比色磁酶免法，虽然具有简便的优点，但由 于检测灵敏度低，线性范围窄，且容易受实验因素的干扰，其应用受到了‘定的限制。本论文将磁 酶免疫法的高特异性和化学发光的高灵敏度优势进行结合，利用我们自行制备的超顺磁性聚合物磁 珠，开发了肿瘤标忠物Free hCOO的化学发光磁酶免疫法检测，避免了采用传统ELESA巾抗体包被 的过程，既节约了检测时间又节省了成本。该方法与比色法比较具有样晶用量少，仪器操作简便， 检测时间由2小时缩短为l小时，检测限为O．22mlU／ml，较比色法下降了一个数最级，线性范罔 更宽，为o．45．185．2 mIU／ml，实验操作简便，仪器要求简单。在检测临床标本中与酶联免疫的比 色法结果的相关系数为0．955，化学发光磁酶免疫分析法可以代替临床上普遍使用的比色磁酶免疫 ．I． 东南人学博十学位论文 法。 【3)食品中大肠埃希菌E．Coli0157：t17的化学发光磁酶免疫法检测 Escherichiacoli，EHEC)是+一种新的致病性大肠杆菌， 肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic 血小板减少性紫癜(TTP)。致病力很强，已被世界卫牛组织(WHO)确定为新发现的28种传染病病 原体之一，成为食品安全和公共卫生监控的重点之‘。目前对它的柃测方法，主要足培养后进行分 型分析，往往耗时较长，且易受实验因素的干扰，无法为疾病预防和治疗提供及时准确的信息。本 0157：H7，并将其用丁猪肉中 论文首次提fI；了采用化学发光磁酶免疫分析法检