栝楼性别转化的APD-SCAR标记研究.pdfVIP

摘要 kirilowii 栝楼(Trichosanthes Maxim)是葫芦科栝楼属的一种药食两用植物，多 年生草质藤本。栝楼种植历史悠久，栝楼根、果皮、果实均可入药。随着近年栝楼籽 休闲食品的开发，栝楼的根与果实的主要用途发生很大变化，市场价格相差悬殊，从 综合效益考虑，有效控制雌、雄株比例在生产上是非常必要的。栝楼雌、雄异株，在 栝楼未开花前从形态上很难辨别雌雄株，所以，所以在苗期利用分子生物学的方法鉴 别未成熟栝楼的性别，可为栝楼生产上合理的雌、雄性植株田问配置以及育种工作中 的早期选择等提供科学依据，对栝楼产业持续、快速、稳定发展奠定了基础。 本文利用RAPD和SCAR分子标记技术对同一来源栝楼块根经组织培养后分化 成的不同性别的二年生栝楼进行研究，发现了在雄性栝楼中，可以稳定的得到一条 569bp的条带，而雌性栝楼中没有。该结果为栝楼苗期性别鉴定筛选提供了新的途径， 为进一步的栝楼性别分化的机理研究提供了参考和依据。 主要试验研究内容与结果如下所述： 1．栝楼叶片含有多糖和多酚，通过改良的CTAB法，所提取的栝楼基因组DNA 带明亮清晰，没有拖尾现象，能够满足PCR扩增需要。 后的反应体系为：在25此反应体系中，含10xbuffer 聚合酶1U，引物0．8lamol·L一，dNTPs 带，经过多次重复，发现在所选择雌、雄性栝楼样品DNA之间出现的差异性的引物 只有1条。 性栝楼DNAhb产生l条600bp左右的特异性的扩增带，将这一特异条带命名为 S1200．600。经过多次重复试验，结果表明其重复性较好。 利用PrimerPremier5．0软件设计了一对特异性引物，通过退火温度的筛选，最终选择 10xbuffer 2．51xL，Mg什2此，TaqDNA聚合酶0．2此，引物I2此，引物II 21-tL，dNTPs 转化为SCAR标记。可作为栝楼品种早期性别鉴定的遗传标记。 关键词：栝楼，RAPD，SCAR，性别 Abstract Snakegourd，or kirilowii PerennialHerbliana Trichosanthes(TrichosanthesMaxim)is ofmedicinalin Cucurbitaceae．Trichosantheshavea plantfamily of longhistory cultivation inchina．Withthe of as Trichosanthesaleisure development food，great hadbeentaken inthemain of changes place therootandfruitandthereisalso Purpose have differenceintheir theconsiderationof great is price．From ComprehensiveBenefit,it tocontrolthe rat