六倍体小黑麦、工合成小麦及普通小麦籽粒硬度形成的分子基础.pdfVIP

摘要 籽粒硬度是影响小麦食品加工品质的重要性状之一，研究籽粒硬度形成的生化和分子基础对 于小麦品质改良具有重要意义．本研究咀来自CIMMYT的171份六倍体小黑麦和57份人工合成 小麦作为研究材料，利用单籽粒谷物特性测试仪和PCR扩增、酶切及DNA测序技术，结合改良 的fiiabiltu提取及电泳分析方法，研究其籽粒硬度形成的生化和分子机理。对山东省的431个农 家品种、63个历史品种和29个当前主栽品种的籽粒硬度分布以及鼢4和Pmb等位变异类型进 行了研究，探讨山东小麦籽粒硬度的演变规律。将构建完成的A懈和Pinb融合表达载体转入四 倍体的硬粒小麦中，利用转基因技术进行Pina和珊西基因功能的验证。主要研究结果分为以下 四个部分： 1．171份六倍体小黑麦的籽粒硬度变异范围很大，最软的SKCS值为8．6，最硬的为84．9。软质 而且在信号肽区域有一个半胱氮酸(Cys)的插入。 2．57份人工合成六倍体小麦是由野生二粒小麦与山羊草杂交形成的，其SKCS硬度值变异较大， 但父本山羊草和母本野生二粒小麦以及二者问的互作对耔较硬度有显著影响，说明除了Pina和 l：inb外，还有其他微效基因影响籽粒硬度的形成。 3． 山东农家品种，历史品种和当前主栽品种的籽粒硬度具有不同的分布特点，软质、硬质和混 合麦比例在不同时期有显著变化．农家品种、历史品种和当前主栽品种中硬质麦比例分别为 长芒透垅白等3个品种的Pinb基因的核苷酸序列发生了双突变，起始密码子下游的96bp处碱基 C突变为A，而且在265bp处发生了A碱基的缺失，命名为Pinb-Dlp4-． 可靠． 相连接，完成了戚憎、朋出融合基因植物高效表达载体pFUBPaPb的构建．利用基因枪转化硬粒 共得到Tl代籽粒356粒，对种子量较多的16个Tl单株籽粒进行蛋白表达分析，其中2株检测到 基因表达产物． 关键词：六倍体小黑麦，人工合成小麦。普通小麦，籽粒硬度，Friabilin蛋白，AM和A曲，基 因转化 Ⅱ Abstract Kernelhaz-thle!wis in the andend-useofbread veryimportant determiningmilling,bakingquality wheat thebiochemicalandmolecularmechanismof hardnessformationis Understanding grin for wheatvarietieswith texture．Inthe helpful endosperm breeding optimal presentstudy,171 l缸es．57 from hiticale linesderived Tr／t／cum secondaIyhexaploid syntheticbexaploid from crosses,and523varieties 431 dicoccoidesxAegilops$quarrosa Shandongprovinceincluding varietiesand29 wmusedtoevaluatethe landraces,63historical currentvarieties SKCS hardness, friabilinoocuiTencedistributi