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牛源乳铁蛋白体抗乙肝病毒感染HepG2细胞的研究.pdf
摘要
目的:乳铁蛋白是一种具有多种生理功能的天然活性糖蛋白,研究表明乳铁蛋白能够抑
制多种病毒,如人体免疫缺陷性病毒(HIⅥ、细胞巨化病毒、疱疹病毒l和2型、丙型肝炎病
毒(HCVl等。本课题旨在研究牛源乳铁蛋白、锌饱和乳铁蛋白、铁饱和乳铁蛋白以及乳铁蛋
白水解物对乙型肝炎病毒的抑制作用.
方法:本研究采用天然唧v感染HeDG2细胞建立病毒细胞模型,通过M丌法测定BLF、
zn_BLF、Fe.BLF及乳铁蛋白水解物的对细胞的毒性并确定最大无毒作用剂量,并以此剂量
作倍比稀释进行抗病毒研究;试验采用ELISA法应用乙型肝炎表面抗原试剂盒检测乙型肝炎
表面抗原的被抑制情况,同时采用荧光定量PCR法对HBV-DNA的被抑制情况进行测定.
结果:
·mJ.J,并通过对其生长曲线的测定确定了应用含3%血清的培养液作为维持液来培养细胞。
BLF的最大无毒剂量为3.0
Fe-BLF的最大无毒剂量为3.0
g-L1;乳铁蛋白水解物的最大无毒剂量为1.5g-L1。试验均采
用其无细胞毒性剂量进行抗病毒研究。
乳铁蛋白水解物对HBsAg分泌无抑制作用。BLF不能通过与HBV结合来抑制皿v对细胞
的感染,但可以通过与细胞某位点结合来阻断HBV对细胞的侵染。
白水解物对HBV-DNA只有微弱的作用。
结论:本研究结果表明,在体外牛源乳铁蛋白及锌、铁饱和乳铁蛋白对乙型肝炎病毒有
显著的抑制作用,但乳铁蛋白水解后对乙型肝炎病毒无明显抑制作用,这说明其抑制作用与
乳铁蛋白的整体结构有关,但其作用机制应是多方面的,且有待于进一步探讨。
关键词牛源乳铁蛋白:锌饱和乳铁蛋白;铁饱和乳铁蛋白;乳铁蛋白水解物;乙型肝炎病毒
乙型肝炎表面抗原;抑制作用;HepG2细胞系
Studiesof EffectofBovineLactoferrinon
Inhibitory
BVirus Cellinvitro
HepatitisbyInfectingHepG2
Abstract
whichhas funetiomisanaturalactive
Objective:Laetoferrinmulti-physiological giycoproteim
StudiescmlfhmthatLactoferrincallinhibit viruses.suchashuman
many
virusIandlI Cvims(ncv)eta1.This
virus(HIⅥ,eytomegalovirus,herpestypes,Hepatitis paper
aimedal the effectofbovine
studyinginhibitory lautoferrin,
iron-saturated
lactuferrinandlaetoferrin onHBV.
hydrolysate
Methods:NatureB usedtoinfect test
virus(帅v)was cell∞model,MTT
h印撕tis HepG2
wasusedtoexalnine effectof zinc-saturated laetoferrin
c州oxic BLE l拟oferrin,iron-saturated
andlaetofmrin inaximumnontoxic those wemde
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