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显微操作技术 生命科学学院 杨东 QQ1034683507 第1章 显微技术发展历史 1.1.1生物学显微技术的概念: 是基于生物学理论知识,以生物体为材料,在光学显微镜观察的范围内所开展进行的实验操作技术. 1.1.2显微镜的发明史 ★十六世纪的显微镜 ★十七世纪显微镜镜 ★十八世纪的显微镜 ★十九世纪的显微镜 ★二十世纪的显微镜 ★未来的显微镜 十六世纪的显微科学 十六世纪单式显微镜 十六世纪复式显微镜 十七世纪的显微科学 单式显微镜的发展 单式显微镜有一个致命的缺点, 它的焦距与透镜直径成正比,与放大倍数成反比。也就是说,焦距越短,放大倍数越大,而透镜直径又越小。 如果放大倍数是100倍,透镜的焦距为0.25毫米,透镜直径大约为0.33毫米。这个比大头针头还小的透镜在当时根本制造不出来。因此,当时的放大镜的放大倍数最多不过25倍。 复式显微镜在性能上明显优于单式显微镜。一是它的放大率可以做得很高,可以把几个放大倍数较小的凸透镜组合起来获得很高的放大率。二是制造工艺较简单,不必磨制一个个极小的透镜。复式显微镜的发明,是科学史上的里程碑,人类从此开始认识微观世界。 伽利略的显微镜 十八世纪的显微科学 ????十八世纪是欧洲科学复苏的时期,各种新的科学理论层出不穷。由于不被人十分重视,十八世纪的复式显微镜发展很慢,但仍然做出了一些漂亮的显微镜。 Cuff显微镜的功能在当时是最多的.它有三种性能:透射观察,落射观察和活体观察.其中,活体观察功能是在当时复式显微镜中特有的。 Cuff显微镜是当时最好的复式显微镜.  Cuff-Style显微镜 Chest显微镜 历史上最豪华的显微镜:英王GeorgeIII的银显微镜。 十九世纪的显微科学 ????十九世纪，随着工业革命的进行，显微科学也同其它学科一起飞速发展起来。其主要的原因是机械的使用使透镜的质量大大提高和光学的发展使显微镜的结构更加符合光学原理。 Ladd的学生显微镜? 二十世纪的显微科学 由于人们在物理，数学和材料科学等领域取得了非常大的进展，显微镜的质量大大提高。 各种新型的显微镜也应运而生。 各种新技术也相继出现。 数字成像技术开始了用计算机来处理传送显微影象的时代，使人们记录显微影象的方式又前进了一步。 1.明场显微镜 2.暗场显微镜 3.相衬显微镜 4.偏光显微镜 5.干涉显微镜 6.紫外显微镜 7.荧光显微镜 8.体式显微镜 另一种荧光显微镜 万能研究显微镜功能繁多：有明视野，暗视野，相差，偏振，微分干涉，荧光，显微摄影等等，有的还具有显微操作的功能。是一种高档次的显微镜。 未来显微镜的发展 一、 拍得更清晰 二、 放大倍数更高 三、 更为人性化的设计 四、 一体化的显微镜 五、 专门的网络化显微镜 六、 光源的革新 一、 拍得更清晰 显微镜厂商为此开发出各种各样的显微镜镜头来消除各种色差和场曲。 最近，在显微镜上普遍采用了 UIS2光学系统，它充分体现了无限远校正方式的优越性。UIS2无限远光学系统的物镜具有在宽波长范围内（由紫外至近红外区）具有一致的高透过率。同时具有更高的信噪比，不需要额外补偿就可以得到更为清晰的图像。 二、 放大倍数更高 通常情况下，目镜的放大倍数为10倍或者16倍。以40倍物镜为例，也不过是放大400倍或者是640倍，如今却能够将放大倍数提高到840倍。例如美国AMG公司开发的倒置显微镜，在物镜下采用了21倍的光学放大，使得我们能够通过40倍的物镜就可以观察到放大倍数更高的图像了。如果换成100倍的油镜，就可以通过显示器观察到放大到惊人的2100倍甚至更高的图像，无不让人赞叹技术的发展之快。 　三、 更为人性化的设计 　四、 一体化的显微镜 五、 专门的网络化显微镜 Nikon公司的Coolscope和Leica公司的DMD108为临床远程病理会诊提供了方便，它们专门为载玻片显微观察设计，自动转换物镜，自动对焦，得到的图像可直接通过网络发送到异地进行专家会诊。 六、 光源的革新 对于荧光显微镜，到现在为止绝大多数显微镜还在使用卤钨灯或者是高压汞灯，一方面这类光源使用寿命短，需要3到4各月更换一次，每次更换后都需要专业工程师进行位置校准；另外一方面，这类光源的强度会随着使用寿命而衰减；还有一方面，这类光源对于显微镜操作来说需要预热来等待光源强度稳定，而且光源关闭后需要等待30分钟左右才能重启. 总观光学显微科学四百多年的历史,显微科学也得到了飞速发展。我们可以看到,任何一个学科的发展都离