甘遂饮片的炮制工艺、质量标准及解毒机理分析研究.pdfVIP

中文摘要 甘遂饮片的炮制工艺、质量标准及解毒机理研究 摘 要 本论文来自于江苏省中医药管理局中医药科学技术研究专项课题“甘遂饮片的炮 kansuiT．N． LiouexT．E Wang)的干燥块根，系有毒中药，生品仅限外用，内服必须炮制。中国历 版药典仅对甘遂药材作了部分规定，缺乏其炮制品的质量控制标准，对炮制机理的研 究更加匮乏。开展甘遂饮片炮制机理的研究，揭示其炮制减毒的科学内涵，是确定其 最佳炮制工艺，制定质量标准，提高临床疗效的关键。 本论文系统地探究了甘遂各饮片的炮制方法的历史沿革变化轨迹和前人的炮制原 始意图，同时综合分析归纳了甘遂各饮片炮制的化学、药理毒理及临床应用等相关领 域的现代研究文献，为我们开展甘遂饮片的炮制机理研究，确定研究考察指标及研究 起点奠定了坚实的基础。 我们选择产于陕西的道地药材甘遂的块根作为研究对象，在药效和毒理实验评价 跟踪下，着重围绕化学成分分析，尤其是所含毒效相关物质巨大戟二萜醇类成分的含 量变化展开对甘遂饮片的炮制机理研究。首先通过药理毒理学实验比较了甘遂炮制前 后粉末、水提液和醇提液的毒性、刺激性及泻下作用的变化，结果表明甘遂醇提液醋 制后LD50提高4倍左右，皮肤刺激性明显下降，泻下作用得到缓和，进一步验证了甘 遂醋制减毒及缓和药性的科学性。研究中同时发现甘遂的毒性和泻下作用成分主要存 在于乙醇提取物，水提液无明显药理活性；因此我们对甘遂醇提物进行了溶剂极性分 离，并对所得到的3个分离部位进行了毒性评价，结果表明乙酸乙酯部位的毒性最大， 且醋制后毒性下降最为明显，泻下作用有所缓和；再通过对乙酸乙酯部位的进一步硅 胶柱色谱分离又得到四个部位，通过药理实验找到了甘遂的毒效部位．我们对毒效部 位进行了HPLC．MSn分析，结合文献对照发现了其中大量的二萜类成分，尤其是巨大 戟烷型二萜。我们又对甘遂的化学成分进行了提取和跟踪分离，得到了3个巨大戟二 C)、3．D-苯甲酰基．20．去氧巨大戟二萜醇 萜醇型化合物甘遂大戟萜酯C(Kansuiphorin 4’Z-癸二烯酰基)．20．0-乙酰基巨大戟二萜 (3-O-benzoyl．20．deoxyingen01)和3-0-(2E 醇[3—0-(2E acid)，并对其 中的二萜类成分进行了毒性验证。最后，采用HPLC．MS“色谱分析技术，对甘遂和醋 甘遂醇提液的化学成分进行了比较分析，结果表明甘遂醋制后二萜类成分含量整体下 降，尤其是3—0-苯甲酰基．20．去氧巨大戟二萜醇和5．o．笨甲酰基．20．去氧巨大戟二萜醇 的下降最为明显，最大下降了五倍左右。通过以上研究和分析，揭示了甘遂的炮制机 甘遂饮片的炮制机理研究 理可能是醋制后导致了其中二萜类毒性成分含量的整体减少。 4，z-癸二烯酰基)．20．D-乙酰基巨大戟 基于以上研究，我们选择毒性成分3-0-(2E 二萜醇为指标化合物，以醋的用量、炒制温度和炒制时间为考察指标，采用正交试验 法L9(34)优选出了醋甘遂饮片的最佳炮制工艺：醋的用量为30％，炒制温度控制在260 ℃，炒制时间为9min。结果显示此工艺稳定可行，重现性好。 在工艺研究的基础上，我们按照2005版药典要求，对甘遂和醋甘遂饮片进行了一 般质量检查，采用TLC法和化学方法对甘遂和醋甘遂饮片进行了定性研究，采用HPLC 测定了甘遂和醋甘遂饮片中甘遂大戟萜酯C、3．0．苯甲酰基．20．去氧巨大戟二萜醇和 4’Z-癸二烯酰基)．20．D乙酰基巨大戟二萜醇的含量，并检测了各饮片的农药残 3-0-(2’E 留等有害物质，建立了甘遂和醋甘遂饮片的质量控制方法。 最后对甘遂饮片及其炮制品HPLC指纹图谱进行了初步探讨，标定了其中的17个 共有特征峰，各特征峰的调整保留时间之比和相对峰面积之比符合指纹图谱的要求，