杨璐-化学发光磁酶免疫分析法检测梅毒螺旋体抗体(西北大学硕士学位毕业PPT)..pptVIP

4 参考值 6 对比实验 1 稳定性 3 标准曲线 2 5 精密度 特异性 第二部分 实验方法的评价 西北大学 稳定性 化学发光试剂分别置于4℃冰箱和37℃生化培养箱中放置6天 将阳性血清分别稀释50倍、100倍、200倍、400倍后进行检测 西北大学 精密度 国家标准（≤15%） 批内差： 2.86%～5% 次数 检测结果 阳性检测平均值 RSD（%） 1 P N 5423 15 5735 23 6249 15 6057 15 5747 15 5949 23 5860 5 2 P N 5998 23 5923 23 6394 15 6125 15 5876 23 5972 15 6048 3.10 3 P N 6074 15 6249 15 6302 23 6515 15 6156 15 6022 15 6219 2.86 4 P N 6287 15 6166 23 6743 23 6534 15 5983 23 6012 23 6288 4.77 5 P N 5923 23 5799 15 6401 15 6137 23 6117 15 6093 23 6078 3.38 西北大学 批间差： 5.1%～9.7% 西北大学 次数 检测结果 批次1 批次2 批次3 阳性检测平均值 RSD（%） 1 P N 3895 15 3918 8 4829 15 4822 15 4487 8 4692 15 4441 9.7 2 P N 4329 15 4052 8 4723 15 4810 15 4541 15 4752 8 4534 6.5 3 P N 3987 8 4189 15 4428 8 4783 8 4431 15 4246 8 4344 6.2 4 P N 3995 8 4096 8 4624 15 4742 8 4267 8 4368 15 4349 6.7 5 P N 4016 15 3979 8 4572 15 4226 8 4146 15 4144 15 4181 5.1 质控标准品10次重复测定结果 质控品：抗-TP标准物质（2NCU/mL） 相对标准偏差：5.42% 西北大学 标准曲线 将梅毒螺旋体抗体质控标准品（4 NCU/mL）梯度稀释，在0.25 ～4 NCU/mL范围内线性良好 Y = 599.1X-165.9 R2 = 0.9980 西北大学 参考值（临界值确定） 检测100例临床阴性血清样本 临界值： ⑴P/N≥2.8，计算得出该方法的临界值为： COV=72.8 ⑵P≥X+3SD，计算可得临界值为：COV=47.6 ⑶P/N≥2.1，计算可得临界值为：COV=54.6 发光值=54.6 西北大学 特异性 阴性符合率均为100% · 80例临床血清样本 · 20例乙肝阳性血清 样本（TP阴性） · 20例丙肝阳性血清 样本（TP阴性） 本次实验：COV=N×2.1=54.6 西北大学 乙肝阳性样本检测结果 丙肝阳性样本检测结果 COV=54.6 COV=54.6 乙肝血清样本 丙肝血清样本 阴性符合率均为100% 西北大学 化学发光磁酶免疫分析法与商品化化学发光试剂盒对比 灵敏度比商品化化学发光试剂盒提高4倍 阳性血清 稀释倍数 检测结果 商品化试剂盒 化学发光磁酶免法 (MECLIA) 1:100 + + 1:200 + + 1:400 + + 1:800 + + 1:1600 + + 1:3200 + + 1:6400 - + 1:12800 - + 1:25600 - + - 1:51200 - - 西北大学 化学发光磁酶免法 （COV=N×2.1=53.2） 商品化化学发光试剂盒 COV=N×2.1=26151） 特异性对比实验：二者相当，阴性符合率均100% 20例阴性血清样本 20阴性血清样本 COV=53.2 COV=26151 西北大学 西北大学 第二部分实验小结 国家法规： 《体外诊断试剂注册管理办法》 ·分析性能评估资料：分析灵敏度、分析特异性、检测范围 批内不精密度、批间不精密度等项目 ·参考值（参考范围）确定 ·稳定性研究资料 《发光免疫分析试剂生产及质量控制技术指导原则》 根据各个试剂盒的企业标准或者制检规程进行检验，检验指标一般包括准确性、灵敏度、特异性、精密性（批内差）、相关性等，均应达到相应的质量标准。 稳定性：4℃，及37℃加速破坏性实验，均显示保存稳定性良好； 精密度： 批内差在2.86