高纯度质粒DNA规模化生产流程的建立和改进.pdfVIP

维普资讯 现代食品科技 ModernFoodScienceandTechnology 2008，Vo1．24，No．5 高纯度质粒DNA规模化生产流程的建立和改进 李刚刚，刘耘，曹以诚 (华南理工大学生物科学与工程学院，广东 广州 510006) 摘要：通过对质粒提取过程进行分析，探讨质粒提取过程中的影响因素，分析影响质粒质量的因素，以及优化提取工艺流程， 并建立质控标准来控制质粒提取过程中带来质量和数量损失，从而制备出高纯度的质~3,．DNA。温度诱导可以增加质~3,-DNA的产量， 在大肠杆菌对教生长中期进行温度诱导，从37 3℃，每间隔l℃度进行诱导，结果表明经42℃诱导l2h，质粒DNA的产量可以增加 66％以上，为降低成本，大规模生产重组质粒提供良好保障。另外对碱裂解粗提质粒的方法和流程进行改进，采取LiC1去除细胞碎片 和杂蛋白；PEG8000沉淀质粒DN 从而去除经RNA